目的双氯芬酸钠治疗类风湿关节炎机制的再研究,并从糖酵解方面探讨其可能机制。方法MTT法检测细胞增殖抑制;基因芯片检测糖酵解和线粒体相关基因的变化;利用计算机辅助药物设计基于蛋白结构的靶点进行预测,使双氯芬酸分别与糖代谢相关的蛋白晶体结构进行分子对接,选择结合活性预测高的靶点进行详细分子作用分析;乳酸试剂盒检测胞内乳酸变化,通过脂质体Lipofectamine 2000将si-COX-2 Inhibitor、si-PKM2 Inhibitor、si-GLUT1 Inhibitor分别转染至人RA FLS细胞,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,RT-q PCR法和Western blot法分别检测糖酵解相关基因和蛋白的相对表达水平;2-NBDG检测大鼠关节滑膜组织葡萄糖摄取变化;免疫组化法检测大鼠滑膜组织COX-2糖酵解相关蛋白PKM2、GLUT1相对表达量。结果双氯芬酸对RA FLS细胞糖酵解有显著抑制作用,其中对糖酵解酶PKM2和GLUT1抑制作用较明显,机制为双氯酚酸钠通过COX-2介导RA FLS细胞中GLUT1/PKM2途径的诱导细胞凋亡。免疫组化结果同样证明双氯芬酸钠对大鼠滑膜组织糖酵解酶GLUT1,PKM2有显著抑制作用。结论双氯芬酸能够抑制RAFLS细胞上升的糖酵解,通过抑制COX-2介导RAFLS细胞中GLUT1/PKM2途径进而诱导RAFLS细胞凋亡。