酶解啤酒糟制备富含低聚木糖饲料添加剂的研究

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低聚木糖具有改善动物肠道微生态环境、增强机体免疫力和提高饲料利用率等功能,是一种新型的绿色饲料添加剂。啤酒糟是啤酒工业的副产物,除富含蛋白质、碳水化合物、脂肪、矿质元素等营养物质外,还含有纤维素和半纤维素等抗营养因子,限制了啤酒糟在动物饲料中的应用。本文在建立低聚木糖的HPLC-ELSD含量分析方法的基础上,探讨了啤酒糟制备低聚木糖的预处理工艺和酶解工艺条件。主要研究结果如下:1、HPLC-ELSD法测定啤酒糟中低聚木糖含量的建立以COSMOSIL Sugar-D糖分析柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水(69:31,V/V),流速为0.9mL/min,柱温40℃,进样量3μL,Evaporator Temperature为78℃,载气流速为1.6L/min,载气压力为0.5MPa。结果表明,木二糖-木五糖分别在0.024mg/mL-0.245mg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系,检出限分别为0.025mg/mL、0.025mg/mL、0.0243mg/mL、0.024mg/mL,定量限分别为0.091mg/mL、0.091mg/mL、0.089mg/mL、0.889mg/mL,RSD保留时间分别为:0.203%、0.224%、0.233%、0.252%,样品加标回收率为:97.31-99.83%。2、啤酒糟预处理工艺条件研究及优化以啤酒糟为原料,采用单因素试验法研究了超声波、微波、高温蒸煮、化学法等预处理方法和预处理工艺(碳酸钠浓度、双氧水浓度、料液比、预处理温度、预处理时间)对低聚木糖产量的影响,并采用正交试验法对低聚木糖产量影响较大的因素进行了优化。结果表明,啤酒糟适宜的预处理条件为:碳酸钠添加量0.7%,双氧水添加量0.1%,固液比1:5,预处理温度115℃,预处理时间30min。在此条件下,啤酒糟中低聚木糖产量为19.4693mg/g。3、啤酒糟酶解工艺条件研究及优化采用单因素试验法研究了初始pH值、木聚糖酶量、纤维素酶量、酶解温度、酶解时间等酶解条件对啤酒糟低聚木糖产量的影响,在单因素试验结果基础上,采用响应面试验法对酶解条件进行了优化,建立了初始pH值、木聚糖酶量、纤维素酶量、酶解温度和酶解时间5个因素对影响低聚木糖产量的二次回归方程模型,模型的复相关系数为0.9433,说明94.33%的低聚木糖产量可用此模型来解释,变异系数为3.33%,信噪比为17.318,说明模型可信度较高。在适宜的酶解条件下(初始pH值5.5,木聚糖酶201U/g,纤维素酶248U/g,酶解温度48℃,酶解时间3h),低聚木糖产量为23.867mg/g,与理论预测值23.764mg/g相比,相对误差仅为0.43%,说明该模型能较好地预测在此条件下低聚木糖产量的实际情况。
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