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硫酸乙酰肝素6-O硫酸基团转移酶2 (HS6ST2)是一种特异性硫酸化修饰硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPG),硫酸乙酰肝素糖链(HS)上6-O硫酸基团位点的酶。已有研究结果表明HS6ST2基因参与调控卫星细胞增殖分化相关的Wnt、TGFβ、Notch等重要信号通路的信号转导,说明HS6ST2基因与骨骼肌生长发育相关,但关于该基因是如何影响鸡骨骼肌生长发育以及其促卫星细胞增殖分化的调控机制目前还未见详细报道。为此,本研究分离培养了1周龄、2周龄、6周龄海兰蛋鸡和艾维茵肉鸡原代骨骼肌卫星细胞,通过RT-PCR技术检测蛋鸡、肉鸡卫星细胞中HS6ST2基因的mRNA表达差异。通过构建HS6ST2基因的过表达载体和干扰载体,转染鸡原代卫星细胞,采用RT-PCR、CCK8细胞增殖检测以及细胞形态学观察等方法来初步探讨HS6ST2基因在鸡原代卫星细胞增殖分化调控以及细胞内Wnt/β-catenin、TGFp/MSTN. Notch三条重要信号通路转导中的功能。结果表明：(1)分离培养的蛋鸡和肉鸡原代骨骼肌卫星细胞经细胞免疫荧光鉴定纯度均高于90%；蛋鸡原代卫星细胞的分化能力低于肉鸡,培养过程中肉鸡卫星细胞约比蛋鸡卫星细胞提前12h出现肌管。(2) RT-PCR检测发现分离培养的1W、2W、6W周龄的蛋鸡原代骨骼肌卫星细胞中HS6ST2基因mRNA表达水平在体外培养各阶段均高于肉鸡,且在体外贴壁0h时,不同周龄的蛋鸡和肉鸡卫星细胞间HS6ST2基因mRNA表达量均差异显著(P<0.05),无论蛋鸡还是肉鸡卫星细胞中HS6ST2基因mRNA的表达量均随日龄增加而降低；说明蛋鸡和肉鸡卫星细胞中HS6ST2基因表达确实存在显著差异。(3)构建HS6ST2基因过表达载体和干扰载体,转染鸡骨骼肌卫星细胞后,与阳性对照组相比,干扰HS6ST2基因后细胞数目显著减少,但其肌管出现时间和生成量均早于和高于对照组,过表达该基因后的情况则与干扰组相反。通过CCK8检测构建的转染后各组细胞增殖曲线显示,与阳性对照组相比,干扰组增殖速率显著低降低,过表达组增值速率显著上升；此外干扰组卫星细胞中MyoD、 MyoG、MYHC基因mRNA表达量显著高于阳性对照组1), Pax7基因表达水平则显著低于阳性对照组(P<0.01),过表达组情况均与干扰组相反。以上结果说明HS6ST2基因对卫星细胞具有促进增殖和抑制分化的功能。(4)通过RT-PCR检测干扰和过表达HS6ST2基因对卫星细胞中Wnt/β-catenin、 TGFβ/MSTN、Notch通路关键蛋白基因的表达情况表明,与阳性对照组相比,干扰组卫星细胞Wnt/β-catenin通路中的GSK3β基因nRNA表达量显著降低(P<0.05或P<0.01)、β-catenin表达量显著上升(P<0.01);TGFβ/MSTN通路中的ACVR1、ACVR2基因mRNA表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01); Notch通路中的Notch1、Hairy1、Hey2基因mRNA表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01), Numb基因mRNA表达量显著上升(P<0.01)；过表达组情况均与干扰组相反。以上结果说明HS6ST2基因对卫星细胞中的Notch通路和TGFβ/MSTN通路具有正调节作用,对Wnt/β-catenin信号通路具有负调节作用。