目的：T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia, T-ALL)是来源于T淋巴细胞的恶性克隆性肿瘤，发病率约占儿童ALL的10％-15％，占成人ALL的25％。T-ALL的发病机制常涉及造血前体细胞的遗传基因的改变，导致细胞周期调节紊乱，成熟分化受阻，自我复制增殖过度,凋亡受抑等。在近年的临床治疗中，T-ALL患者的缓解率和长期生存得到了显著改善，但仍有30%的病人存在复发和预后不良现象。因此，深入研究T-ALL的发病机制，探索新的治疗靶位仍有重要意义。PTEN是第一个发现的具有双特异性磷酸酶活性的肿瘤抑制基因，其主要功能是作为脂质磷酸酶使三磷酸-磷脂酰肌醇（PIP3）脱磷酸化，转化为二磷酸-磷脂酰肌醇（PIP2）。PTEN则通过降低PIP3的量而成为PI3K/AKT信号通路最重要的负调控因子，逆转PI3K的作用，从而引起其下游的一系列信号分子的变化，使细胞周期停滞于G1期，抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡。目前研究表明，无论是在实体瘤还是在造血系统恶性肿瘤中，均存在PTEN功能的缺失。T-ALL中PTEN的作用近来也引起重视，但具体机制尚不清楚。NOTCH信号通路影响造血细胞增殖与分化、凋亡多个过程中，其中NOTCH1在T细胞的发育过程起重要作用，对T细胞发育的各个阶段进行精细调节。T-ALL中NOTCHl的突变和异常活化是近来研究的热点，是T-ALL中可能发展的靶向治疗靶点。PTEN和NOTCH1均与T-ALL的发生发展密切相关，但具体作用机制及其在疾病中的相互作用有待于进一步阐明。在T-ALL中存在NOTCH1的突变缺失，最终导致NOTCH信号转导通路的过度激活，促进T细胞发育,阻碍B细胞的发育,从而导致T淋巴细胞瘤的形成。NOTCH信号转导通路的激活主要从以下两方面导致肿瘤形成：1、诱导原癌基因C-MYC的过表达；2、持续激活P13K/AKT等抗凋亡信号通路。但对于频繁的GSI（NOTCH信号通路抑制剂，γ-secretaseinhibitor）耐药问题的研究发现，PTEN基因缺失可能是主要原因，因此NOTCH1与PTEN在肿瘤发生发展中是否存在相互的调控机制有待进一步研究。而C-MYC是NOTCH信号通路下游一重要分子，又作为原癌基因在许多肿瘤中都存在过表达，降低或阻断其过表达能够抑制肿瘤细胞的生长并促进其凋亡，但其触发T-ALL发生发展的机制尚未明确，但是可能作为连接PTEN/AKT与NOTCH1的桥梁而对白血病提供靶向治疗。本研究旨在于通过构建PTEN基因高表达载体，研究PTEN基因对T-ALL细胞系JURKAT增殖凋亡的影响，初步阐明其机制；检测转染PTEN基因前后T-ALL相关基因NOTCH1、C-MYC表达的变化，进一步研究PTEN与C-MYC在白血病发生发展中的相互作用，治愈白血病提供实验依据。方法：将携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒（Ad-PTEN-GFP）和仅携带有编码绿色荧光蛋白基因的空载体腺病毒（Ad-GFP）分别转染人T淋巴细胞白血病细胞株JURKAT细胞；流式细胞仪检测细胞凋亡情况。MTT法检测细胞生长抑制率。反转录PCR（RT-PCR）检测转染前后PTEN、 C-MYC、 NOTCH1mRNA表达水平变化。结果：1本实验成功构建了PTEN基因高表达载体，应用携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒（Ad-PTEN-GFP）转染JURKAT细胞系。2转染JURKAT细胞48h后，提取RNA，RT-PCR方法检测转染PTEN基因后JURKAT细胞中PTEN呈高效表达，表明转染成功；3转染野生型PTEN基因的JURKAT细胞表现为增殖明显受抑，与转染空载体组和未转染组比较有统计学意义（P＜0.05），而后两组之间差别无统计学意义(P>0.05)。4转染野生型PTEN基因的JURKAT细胞表现为凋亡增多，与转染空载体组和未转染组比较有统计学意义（P＜0.05），而后两组之间差别无统计学意义(P>0.05)；5转染野生型PTEN基因的JURKAT细胞NOTCH1、C-MYCmRNA表达水平则明显低于转染空载体组和未转染组(P<0.05)，且后两者下降有相关性(P<0.05)。结论:1本实验应用携带有野生型PTEN基因及编码绿色荧光蛋白基因的腺病毒（Ad-PTEN-GFP）转染JURKAT细胞系，明显抑制人T淋巴白血病细胞系JURKAT细胞增殖，促进细胞凋亡，表明通过抑制PI3K/AKT信号通路，可抑制T-ALL细胞增殖、诱导细胞凋亡。2PTEN基因高表达使NOTCH1表达下调，使C-MYC mRNA水平下调，两者的下调具有相关性。表明PTEN/PI3K/AKT信号通路可以对NOTCH1信号通路具有调控作用，并和C-MYC基因的调控有关。