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背景:肺癌是中国及世界范围内的最高发病率和死亡率的癌症[1]。非小细胞肺癌是肺癌中最常见的类型,占据肺癌总数的85%左右[2]。最新研究显示,非小细胞肺癌患者5年存活率不到15%,而10年存活率不足7%[3]。肺癌的早期转移是患者预后不良的主要原因。而在非小细胞肺癌中肺腺癌的发生率约为80%[4]。肺腺癌约占整个肺癌发生率的70%。目前有关肺腺癌进展及早期转移的分子机制仍未阐明。CXCL16是分泌入细胞间隙的一种趋化因子。而CXCR6是它的受体,存在于细胞表面。在多项研究表明CXCR16/CXCR6轴与多种肿瘤的进展、转移有密切的相关,包括甲状腺癌、前列腺癌、膀胱癌,及胃癌等。CXCL16/CXCR6的激活为肿瘤细胞生长、粘附及定向迁移提供条件[6]。个别初步观察研究提示CXCL16、CXCR6可能影响肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力[6,9]。因此CXCL16、CXCR6在肺腺癌的进展及转移过程中可能发挥着重要作用。然而CXCL16/CXCR16是如何具体影响到肺癌细胞的生物学状态,其通过何种分子机制来实现目前仍未有研究报道。JA2K/STAT3是一条由细胞分子刺激的信号传导通路,参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程。JAK2及STAT3在诸多肿瘤中都呈现激活的状态[7,8,9]。研究报道,在破骨细胞生成的过程中,RANKL可以通过降低CXCL16的生成致使JAK2/STAT3信号通路失活[10]。另外,STAT3具有SH2结构域,而CXCR6具有SH2的结合位点。JAK2/STAT3通路受细胞因子受体激活,能够通过对AKT/mTOR通路的调控来调节细胞-细胞的粘附和细胞的迁移能力。因此在肺腺癌转移的过程中,CXCL16/CXCR6轴有可能通过介导JAK2/STAT3的磷酸化来获得完整的分子通路使肺腺癌细胞增殖,侵袭、转移等能力增强,从而促进肺腺癌进展和转移的作用,本课题将围绕这一科学假说进行是研究。目的:利用慢病毒转染技术构建CXCL16过表达及CXCL16表达抑制的肺腺癌细胞,以观察CXCL16/CXCR6轴对肺腺癌细胞进展的影响极其下游的分子通路机制。方法:1.构建Lewis肺腺癌荷瘤的小鼠模型。通过组织切片验证CXCL16、CXCR6在肺腺癌肿瘤部位的表达情况。2.利用慢病毒转染技术构建MOCK（未做任何处理的A549细胞）、NC（CXCL16敲低的对照慢病毒A549细胞）、A3（CXCL16敲低的A549细胞）、CTR（CXCL16敲高的对照A549细胞）、L16（CXCL16高表达的A549细胞）。3.利用EDU标记,CCK-8试剂、单克隆实验、划痕实验及及Transwell小室实验等来测定上述各组细胞系的增殖、迁移、侵袭能力的差异。4.利用实时定量PCR（qRT-PCR）及Western Blot,检测各细胞系内CXCL16、CXCR6、JAK2、STAT3等的mRNA及蛋白表达情况。5.通过上述数据选取其CXCL16/CXCR6其下游可能的分子通路并进一步利用Transwell小室实验验证。结果:1.在小鼠体内荷瘤试验证实CXCL16、CXCR6确切表达于肺腺癌荷瘤的肿瘤组织中。2.EDU标记、CCK-8、及单克隆实验发现上述各组细胞系增殖能力分别为L16>>mock≈CTR≈ShNC>A3,提示CXCL16表达升高时细胞的增殖能力增强。3.划痕实验、Transwell小室迁移实验证明上述各组细胞系迁移能力分别为L16>>mock≈CTR≈ShNC>A3,提示CXCL16表达升高时细胞的迁移能力增强。4.Transwell侵袭实验证明上述各组细胞系侵袭能力分别为L16>>mock≈CTR≈ShNC>A3,提示CXCL16表达升高时细胞的侵袭能力增强。5.通过qrt-PCR及western blot实验发现各细胞系CXCL16的表达量L16>>mock≈CTR≈ShNC>A3。CXCR6随其CXCL16的表达量升高而升高,提示CXCR6能够促进CXCL16的表达。6.通过抑制STAT3,原本迁移、侵袭能力增强的细胞,其迁移、侵袭能力显著降低,而激活STAT3后,迁移、侵袭能力减弱的细胞,其迁移、侵袭能力显著增强。进一步证明CXCL16/CXCR6其下游的分子通路为JAK2/STAT3。结论:在肺腺癌进展过程中,通过CXCL16/CXCR6结合,促使JAK2/STAT3磷酸化并激活信号传导通路,使肺腺癌细胞的增殖、侵袭、转移能力增强从而促进肺腺癌进展。