单宁酸银凝胶的合成、表征和抗菌活性的实验研究

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目的:  纳米银的绿色合成是近年来纳米材料研究的热点之一,现有关于纳米银的制备方法和抗菌性能研究尚缺乏统一标准。单宁酸制备纳米银凝胶是一种简便高效的方法,但其抗菌性能优劣和能否将其应用于临床治疗,国内外未见相关报道。本实验采用一种简便高效的方法制备出稳定性好和粒径均匀的单宁酸银凝胶,并对单宁酸银凝胶进行多种表征分析。在表征单宁酸银相关化学结构性质的基础上,制备出三组不同数量级别的单宁酸银抗菌凝胶,采用MTT法对其进行抗菌性能测定,优化出抗菌最佳浓度,探讨了单宁酸银凝胶对四种不同细菌的抗菌效果,深入研究单宁酸银浓度与抗菌效果的量效关系,为单宁酸银凝胶的临床抗菌应用提供理论依据。  方法:  1、以单宁酸作为还原剂和保护剂合成纳米银制剂。对纳米银银的合成方法进行实验参数优化:如pH和温度等形成条件、反应物摩尔浓度配比;  2、单宁酸银结构的表征分析:运用紫外可见吸收光谱、X射线光电子能谱、核磁共振氢谱和核磁共振碳谱、基质辅助激光解吸电离技术、电喷雾质谱等方法进行表征分析,推断其配位络合作用和结构性能特征;  3、从10-5到10-3不同数量级条件下,合成低、中、高三组不同浓度的单宁酸银产物,并分别测试三组中稳定性最高的最佳浓度。  4、所合成的单宁酸纳米银产物具有高效的抗菌能力,采用多孔板-MTT法对细菌活性进行抗菌性能测试,得到单宁酸银凝胶对大肠杆菌、金葡菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的抑制率,并研究浓度量效关系,探讨此种合成方法得到的单宁酸银纳米凝胶的最佳配方比例,及能否作为潜在的烧伤创面治疗用药。  结果:  1、以单宁酸作为还原剂和稳定剂,在合适的实验条件下还原硝酸银绿色合成单宁酸银纳米凝胶,用UV-vis、XPS、NMR、ESI、MALDI对凝胶产物进行了表征分析,UV-vis结果显示单宁酸与银离子的最佳络合比例为1∶20; XPS结果显示单宁酸银凝胶中表面的银以离子状态和单质状态两种形式共同存在;NMR、ESI、MALDI结果显示单宁酸的酚羟基参与了配位作用,且单宁酸与硝酸银发生络合作用,形成螯合物。  2、配制了低、中、高三组不同数量级别的单宁酸银抗菌凝胶,通过紫外可见光谱对三组进行表征分析以观察每组的最佳稳定浓度,结果为:低、中、高质量分数的抗菌凝胶最佳浓度分别为41mg.L-1、245mg.L-1、2095mg.L-1。  3、对三组抗菌凝胶分别以金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、白色念球菌、大肠杆菌为供试细菌,进行抗菌性能测试,结果显示:四种细菌对低浓度抗菌凝胶均最为敏感,说明低浓度组抗菌活性最强。  结论:  1、建立了一种简便、稳定的纳米银凝胶制备方法,并对其结构进行表征分析;  2、单宁酸银抗菌凝胶具有良好的抗菌效果,确定了不同细菌的抗菌最佳浓度。
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