输合配穴针刺对缺氧缺血性脑损伤小鼠脑组织中NFP、NSE及AQP4表达的影响

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:songshuguiyu00
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目的:通过单侧颈总动脉结扎联合缺氧处理2小时的方法,建立缺氧缺血性脑损伤小鼠的动物模型。运用输合配穴针刺法干预模型鼠,以小鼠脑组织中神经丝蛋白(NFP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和水通道蛋白4(AQP4)表达水平为指标,从免疫组织化学角度研究NFP、NSE和AQP4在大脑皮层中蛋白表达情况,以探讨该种针刺疗法在改善缺氧缺血性脑损伤小鼠神经行为能力方面的作用机制,从而为临床治疗缺氧缺血性脑损伤患儿以及为其提供早期干预方案提供一定的实验基础和理论依据。材料与方法:1.材料:(1)实验动物:新生7d昆明小鼠49只,雌雄不限,体重平均5±0.45g,由辽宁中医药大学实验动物中心提供。(2)主要试剂:兔抗神经丝蛋白、兔抗神经元特异性烯醇化酶和兔抗水通道蛋白4。2.方法:49只新生7天小鼠随机分为模型组(34只)和正常对照组(15只),对模型组小鼠行单侧(右侧)颈总动脉结扎,并缺氧处理2小时,又将模型组随机分为干预组(17只)和非干预组(17只),干预组、非干预组和正常对照组分别命名为Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组。术后第三天开始对干预组小鼠实施输合配穴针刺干预,取穴参照郑利岩大鼠穴位定位的研制,连续针刺6天后休息1天,至生后第28天(P28)停止。在21天、28天时对Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组仔鼠分别进行悬吊实验、斜坡实验、倾斜板实验和旷场实验的检测,同时于第14天、21天和28天对小鼠大脑皮层中NFP、NSE和AQP4的阳性率进行测定。结果:1.干预组小鼠一共17只,实验过程中死亡2只;非干预组小鼠一共17只,死亡3只;正常对照组小鼠一共15只,死亡1只。2.观察模型组脑组织的HE染色切片,可见大脑皮层、海马等区域神经细胞明显减少,神经细胞核固缩明显,核结构呈现不规则状,并且结扎侧较未结扎侧侧显著。3.小鼠大脑皮层中NFP、NSE和AQP4阳性率结果:分别在第14天、21天和28天时,Ⅰ组、Ⅱ组两组脑组织内NSE、NFP和AQP4的含量比较差异均具有统计学意义(P<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组两组分别与Ⅲ组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.运用单侧颈总动脉结扎联合缺氧处理2小时的方法可建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤的动物模型。2.本实验输合配穴针刺法在改善缺氧缺血性脑损伤的小鼠神经行为能力发育方面无明显改善,可能与小鼠处于生长发育阶段或神经行为学的检测方法有关。3.输合配穴针刺法可有效提高缺氧缺血性脑损伤小鼠脑组织内NFP、NSE和AQP4的蛋白含量,进而减轻脑损伤和脑水肿的程度有关。
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