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重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是临床常见的危重病，其发病急，进展快，患者早期即可出现全身炎症反应综合征(systemic inflammatory responsesyndrome SIRS)，导致远离脏器功能不全。急性胰腺炎相关性肺损伤(acutepancreatitis associated lung injury，APALI)，是SAP早期最常见、最严重的并发症。75％的SAP患者早期即可发生，临床上表现为急性呼吸窘迫综合症，死亡率高达30～50％。寻找有效的治疗药物，减轻SAP引起的肺损伤和多脏器功能不全，降低SAP的死亡率，一直是临床研究的热点。重症急性胰腺炎的发病机制复杂，经过大量的基础研究，目前较为一致的观点是：胰蛋白酶在腺泡中异常活化引起胰腺腺泡细胞损伤，NF-kB活化是胰酶异常活化的最重要的始动机制；强烈的胰腺局部炎症反应释放出来的大量炎症介质和细胞因子导致全身炎症反应综合征；过度的全身炎症反应，导致远离器官损伤和多脏器功能不全。肺部是最早和最常受累及的胰外器官，有研究表明中性粒细胞渗出、聚集和粘附分子的过度表达是重症急性胰腺炎引起肺损伤的重要原因。因此，如能有效降低粘附分子的表达和减少中性粒细胞渗出，则有可能减轻重症急性胰腺炎引起的肺损伤。PS-341又称硼替佐米，是目前唯一一个批准进入临床的蛋白酶体抑制剂。PS-341能够特异性抑制26S proteasome活性，使Ⅰ-kBα的降解减少，从而间接抑制了NF-kB活化，使多种炎症介质、细胞因子及粘附分子的表达和释放降低。在急性胰腺炎相关性肺损伤的发病机制中，NF-kB持续活化起着关键性作用。因此，用PS-341进行治疗有可能减轻急性胰腺炎相关性肺损伤。本实验用腹腔内注射雨蛙素及脂多糖制作小鼠重症急性胰腺炎模型，随机分为三组：PS-341治疗组、模型对照组和空白对照组，最后一次注射雨蛙素2小时后比较各组小鼠间血清淀粉酶、C-反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、髓过氧化物酶(MPO)、肺脏病理改变及细胞粘附分子(ICAM-1、E-selectin、P-selectin)的表达差异，探讨PS-341对小鼠急性胰腺炎相关性肺损伤的治疗作用。实验方法1、动物来源：清洁级雌性ICR小鼠60只，体重19～21g，由浙江大学医学院动物中心提供。2、采用腹腔内注射雨蛙素及脂多糖制作重症急性胰腺炎模型：造模前12小时，小鼠禁食不禁水。每隔1小时腹内注射雨蛙0．2ml(50ug／kg)共7次，首次注射雨蛙素后5小时腹腔注射脂多糖10mg/kg。3、实验小鼠随机分三组：PS-341治疗组20只、空白对照组20只、模型对照组20只模型对照组：注射脂多糖前1／2小时腹腔注射50％DMSO 0．2ml(0．9％的NS稀释)空白对照组：用生理盐水代替雨蛙素和脂多糖，依照同样的方法腹腔注射。PS-341治疗组：注射脂多糖前1／2小时腹腔注射PS-341(0．5mg／kg)0．2ml4、小鼠制模后禁食不禁水，观察2小时。5、戊巴比妥钠(50mg/kg)0．2ml腹内注射后麻醉，右侧颈静脉切开取血，提取血清置-20℃冰箱保存；取胰腺及肺组织，一部分用10％福尔马林溶液固定，一部分置与液氮中，然后-80℃冰箱保存。6、用自动生化仪检测血清淀粉酶、CRP、LDH，比较各组水平差异；7、胰腺标本制备石蜡切片，常规HE染色，光镜下比较各组胰腺和肺损伤情况；8、冻存的肺组织取出测MPO水平，用RT-PCR方法检测标本中所含的黏附分子水平(ICAM-1、E-selectin、P-selectin)，比较各组差异。结果1、淀粉酶、CRP和LDH检测结果：模型对照组淀粉酶、CRP和LDH水平远高于空白对照组(p<0．01)；PS-341治疗组淀粉酶、CRP和LDH水平低于模型对照组(p<0．05)；2、病理改变：肉眼观察：PS-341治疗组：腹腔内无或少量腹水，无皂化斑，胰腺和肺脏轻至中度水肿；模型对照组：腹腔内有大量腹水，有较多皂化班形成，胰腺广泛中重度水肿，局部腺叶出血坏死，肺脏充血明显，部分肺脏有出血空白对照组：腹腔内无腹水，无皂化斑，胰腺仅表现为轻度水肿或基本正常，肺脏无殊光镜下观察结果：胰腺：PS-341治疗组：间质增宽；间质、腺体间和血管周围少量炎细胞浸润模型对照组：间质明显增宽，腺叶结构破坏，片状出血、坏死；间质、腺体间和血管周围有多量炎细胞浸润空白对照组：间质略增宽，小叶结构完整，无出血、坏死改变，无炎细胞浸润肺脏：PS-341治疗组：间质水肿，有少量炎细胞浸润，肺泡内无出血，无透明膜形成模型对照组：间质明显水肿，微血管周围有多量炎细胞浸润，肺泡内出血，透明膜可见空白对照组：间质无水肿，肺泡内无出血，血管周围极少量炎细胞浸润3、MPO水平(肺脏)：模型对照组MPO水平远高于空白对照组(p<0．05)；PS-341治疗组MPO水平低于模型对照组(p<0．05)；4、粘附分子水平(ICAM-1、E-selectin、P-selectin)(肺脏)：模型对照组黏附分子水平高于空白对照组(p<0．05)；PS-341治疗组黏附分子水平低于模型对照组(p<0．05)；结论1、PS-341可以降低SAP小鼠血清淀粉酶、CRP和LDH水平。2、PS-341可以减轻SAP小鼠胰腺和肺病理表现，组织出血、坏死和炎细胞浸润减少。3、PS-341可以降低SAP小鼠肺组织MPO水平。4、PS-341可以降低SAP小鼠肺组织中黏附分子(ICAM-1、E-selectin、P-selectin)水平5、PS-341(0．5mg／kg)对小鼠SAP相关性肺损伤有一定的治疗作用