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目的:研究建立莲威阿纳其颗粒的质量标准并评价其对大鼠实验性骨关节炎的作用及机制。方法:(1)采用薄层色谱鉴别方法对莲威阿纳其颗粒制剂中七味药进行定性鉴别研究。(2)釆用InertSustain C18色谱柱(4.6mm250mm,5μm);甲醇-乙腈-1%CH3CH2COOH(12:11:77)为流动相,流速设为1.0ml/min,检测波长设为334nm,柱温设为30℃,进样量为20uL,建立高效液相色谱法同时测定莲威阿纳其颗粒制剂中松果菊苷、毛蕊花糖苷含量的方法。(3)取SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、水煎液组和莲威阿纳其颗粒低中高剂量组。除正常对照组外,开始于试验的第1d、3d、7d分别在大鼠左膝关节腔注射木瓜蛋白酶及半胱氨酸溶液造模之后,除正常对照和模型组外,其余各组连续灌胃给药4周。在整个实验过程中记录大鼠体态变化。4周后腹主动脉取血,测定COX2、NO的含量。取各组动物膝关节洗液测定PGE2的含量。在同一解剖部位取下的关节软骨与滑膜制作病理切片,观察滑膜、软骨表面情况。实验数据均用均数±标准差表示,用SPSS17.0进行统计分析。多组计量资料采用one-way ANOVA,P<0.05为差异有统计学意义。结果:(1)薄层色谱能鉴别出肉苁蓉、桑椹、天山雪莲、骨碎补、鸡血藤、威灵仙、淫羊藿,均能显示其对照药材和对照品相同斑点,且阴性无干扰。(2)松果菊苷在37.5ug/mL-51ug/mL(r=0.999,n=6),毛蕊花糖苷在8.5ug/mL-51ug/mL(r=1,n=6)范围内峰面积对进样量呈良好的线性关系,松果菊苷平均回收率为101.26%,毛蕊花糖苷平均回收率为99.89%。采用的色谱条件方法学考察均符合要求,可满足测定的需要。(3)造模后,模型组与正常组相比较,大鼠膝关节直径肿胀明显,左肢脚不沾地,自发活动减少;造模后五周,模型组与正常对照组比较,骨赘形成;药物治疗组大鼠上述行为与模型组比均有一定程度的改善;给药4周后,从体质量角度考虑,LWG中、高剂量组与模型组相比,大鼠体质量增加明显,高剂量组与低剂量组相比,大鼠体质量增加明显,存在一定的剂量效应关系;从膝关节弯曲互动度来说,LWG低、中、高剂量组与模型组相比,大鼠膝关节弯曲活动改善明显,L WG各剂量组与水煎液组、阳性药组相比大鼠膝关节弯曲活动无明显改善,高剂量组与低剂量组相比,大鼠膝关节弯曲活动改善明显并存在一定的剂量效应关系;从降低大鼠血清中COX2、NO含量来说,LWG中、高剂量可以降低COX2、NO含量,LWG各剂量组与水煎液组、阳性药组相比降低COX2、NO含量不明显,高剂量组与低剂量组相比降低COX2含量明显,中、高剂量组与低剂量组相比降低NO含量明显并存在一定的剂量效应关系;从降低OA模型大鼠关节洗液中PGE2的含量考虑,L WG中、高剂量组降低PGE2的含量明显,LWG各剂量组与水煎液组、阳性药组相比降低PGE2的含量不明显,高剂量组与低剂量组相比降低PGE2的含量明显并存在一定的剂量效应关系。在光镜下观察,正常组,关节软骨基质染成粉红色,软骨表面光滑,滑膜无增生;模型组,关节软骨表面缺失,结构不完整;阳性药组,滑膜增生增厚,内膜细胞增生;LWG低剂量组,滑膜内膜细胞增生,肿胀,细胞核深染;LWG中剂量组,部分滑膜细胞肿胀,层数增多,从扁平变为圆形;LWG高剂量组,关节软骨层无明显病变,滑膜内膜增生;水煎液组,关节软骨软骨细胞肿胀,表皮不光滑,线窝消失。结论:本研究建立的LWG薄层鉴别和含量测定质量标准,方法可控、专属性强、重现性好、操作简便;药效学实验证实LWG能有效防治大鼠骨关节炎,其效应相当于水煎液组,作用机制可能与降低体内COX2活性,减少炎症因子PGE2及NO的产生,从而减轻骨关节组织的肿胀变形,抑制软骨破坏、滑膜增厚,改善骨基质代谢,促进骨关节修复有关。