【摘 要】
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鸡蛋暗斑是现代蛋鸡产业需要解决的难题,暗斑鸡蛋不但影响鸡蛋外观,而且更容易侵入沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌。为降低鸡蛋暗斑,提高鸡蛋安全性,本研究探究了暗斑鸡蛋的代谢组学和唾液乳杆菌SNK-6降低鸡蛋暗斑的效应浓度。本研究分2个部分。1、影响鸡蛋暗斑的鸡蛋成分代谢组学研究。以新杨黑羽蛋鸡、海兰褐壳蛋鸡、新杨绿壳蛋鸡、京红1号蛋鸡和贵妃鸡5个品种为素材,检测相同饲养条件下暗斑鸡蛋和非暗斑鸡蛋的代谢组分
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鸡蛋暗斑是现代蛋鸡产业需要解决的难题,暗斑鸡蛋不但影响鸡蛋外观,而且更容易侵入沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌。为降低鸡蛋暗斑,提高鸡蛋安全性,本研究探究了暗斑鸡蛋的代谢组学和唾液乳杆菌SNK-6降低鸡蛋暗斑的效应浓度。本研究分2个部分。1、影响鸡蛋暗斑的鸡蛋成分代谢组学研究。以新杨黑羽蛋鸡、海兰褐壳蛋鸡、新杨绿壳蛋鸡、京红1号蛋鸡和贵妃鸡5个品种为素材,检测相同饲养条件下暗斑鸡蛋和非暗斑鸡蛋的代谢组分差异,开展暗斑鸡蛋和非暗斑蛋的蛋清、蛋膜和蛋壳的非靶向代谢组学研究。结果显示,代谢组学研究检测到26582个代谢产物,其中1757个物质在5个品种的暗斑鸡蛋和非暗斑鸡蛋间存在显著差异（P<0.05）。在蛋清中检测到12213个代谢物,其中暗斑鸡蛋和非暗斑鸡蛋蛋清的正亮氨酸、氧化谷胱甘肽等991个代谢产物有显著差异,占代谢物总数的8.1%,有152个代谢物是上调的,有22个代谢物下调的。在蛋膜中检测到3357个代谢物,显著性差异的代谢物有苯甲酸硫酸、羟嘌呤醇等194个,占代谢物总数的5.8%,上调的代谢物有37个,下调的代谢物有38个。在蛋壳中检测出了11012个代谢物,显著性差异的代谢物有甲磺酸、2-呋喃甲酰基甘氨酸等572个,占代谢物总数的5.2%,上调的代谢物有80个,下调的代谢物有83个。唾液乳杆菌SNK-6降低鸡蛋暗斑的浓度研究。以新杨黑羽蛋鸡为对象,分别以5倍剂量差异和等差剂量递增唾液乳杆菌SNK-6饲喂产蛋母鸡,测定鸡蛋暗斑、产蛋性能和鸡蛋品质。5倍剂量差异饲养试验在产蛋后期蛋鸡进行,设计7个饲喂水平,分别为基础饲粮对照（水平1）、1.0×106 CFU/只（水平2）、5.0×106 CFU/只（水平3）、2.5×107 CFU/只（水平4）、1.25×108 CFU/只（水平5）、6.25×108CFU/只（水平6）和3.125×109 CFU/只（水平7）。饲喂试验结束后,采集回肠和盲肠内容物进行宏基因组测序研究。等差剂量递增饲养试验在5倍剂量差异饲养试验基础上设计,在另一批次的产蛋高峰期的蛋鸡群进行,设计6个饲喂水平,分别为基础饲粮对照（水平1）、1.0×107 CFU/只（水平2）、2.0×107 CFU/只（水平3）、3.0×107 CFU/只（水平4）、4.0×107 CFU/只（水平5）和5.0×107 CFU/只（水平6）。结果显示,饲喂5倍活菌数浓度差异的饲养试验,显示适宜的唾液乳杆菌饲喂浓度为2.5×107 CFU/只母鸡。饲喂产暗斑蛋鸡唾液乳杆菌SNK-6的第四周,2.5×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6组的暗斑率降为0,唾液乳杆菌组相比于对照组,产蛋率提高了18.6%。宏基因组学研究发现,饲喂2.5×107 CFU/只唾液乳杆菌SNK-6蛋鸡的肠道微生物种类较多,回肠新增微生物物种是对照组的45.9%,盲肠差异物种为对照组的9.1%。2.5×107 CFU/只唾液乳杆菌SNK-6减少回肠大肠杆菌数28.1%,减少空肠弯曲杆菌数23.8%。饲喂2.5×107 CFU/只唾液乳杆菌SNK-6的肠道内容物基因功能较多,Egg NOG注释的肠道代谢量是对照组的122.5%,CAZy注释蛋白功能信息量是对照组的139.0%,KEGG注释的代谢过程是对照组的124.7%,人类疾病是对照组的81.6%。饲喂等差活菌数浓度递增的饲养试验,显示适宜的唾液乳杆菌饲喂浓度为2.0×1075.0×107 CFU/只母鸡。饲喂3.0×107 CFU/只、4.0×107 CFU/只、5.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6均可明显降低鸡蛋暗斑,其中4.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6降低鸡蛋暗斑的效率最高,在饲喂的第9周,4.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6组比对照组暗斑率低了35.7%。饲喂5.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6提高产蛋率和降低破蛋率的效率最高,在饲喂后的第6周（炎热天气）,4.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6组的产蛋率比对照组高5.0%,在饲喂后的第二月（高温天气,鸡舍炎热）,4.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6组的破蛋率比对照组低3.9%。5.0×107 CFU/只的唾液乳杆菌SNK-6可以提高炎热天气的蛋壳强度,比对照组高了20.5%。
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