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目的:建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/CDDP并检测其生物学特性。
方法:本研究应用人肺腺癌细胞系Anip973,采用顺铂逐步增加剂量法,诱导建立人肺腺癌耐药细胞模型Anip973/CDDP。细胞计数法绘制生长曲线,计算其倍增时间;光学显微镜和扫描电镜观察其形态;流式细胞仪分析其细胞周期;MTT法测定细胞IC50,计算其耐药指数。
结果:本研究经过24个月建立了人肺腺癌耐药细胞系Anip973/CDDP;通过Anip973/CDDP生物学特性分析发现:(1)光镜及电子显微镜观察,Anip973/CDDP细胞与Anip973细胞比较细胞形态不规则,呈长伪足的多角形及体积增大;胞质内细胞器比较发达,线粒体丰富;(2)与亲代细胞相比Anip973/CDDP细胞生长曲线的倍增时间无明显差异;(3)细胞周期分析发现:耐药细胞系Anip973/CDDP的G0-G1期细胞明显减少,为52.18%,S期细胞明显增多,为28.60%;而亲代细胞系Anip973的上述各周期的百分比分别为66.11%和16.37%(p<0.05),两种细胞系G2-M期细胞无明显变化,提示耐药细胞的DNA合成增加;⑷经MTT法测定Anip973/CDDP细胞比较亲代细胞的CDDP半数致死浓度(IC50)增大至27.26倍,该耐药细胞系同时对伊立替康、吉西他滨、达卡巴嗪、足叶乙甙、诺维本、表阿霉素药物也产生了交叉耐药,耐药倍数分别为20.33、19.96、7.10、5.34、5.27、4.38,而对异环磷酰胺、氟尿嘧啶相对敏感,耐药倍数分别为1.25、1.09(均P<0.05)。
结论:Ainp973/CDDP是可靠的人肺腺癌耐药细胞系,它的建立为进一步探讨顺铂致人NSCLC MDR的发生机制奠定了基础。