【摘 要】
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背景:脂肪移植是整形外科的常用治疗方法之一。脂肪组织因具有廉价、易获得、微创等优点,已广泛应用于软组织的美容、修复和重建。但是,糖尿病患者脂肪移植物保留率低,可能与长期处于高血糖状态,氧化应激、炎性细胞因子表达增加影响移植后移植物血运重建有关。目的:探究高血糖是否会通过影响脂肪移植物中血管内皮生长因子的表达,使移植物血管新生能力受损,进而影响移植物的保留率。方法:本实验采用组间对照,使用雄性健康S
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背景:脂肪移植是整形外科的常用治疗方法之一。脂肪组织因具有廉价、易获得、微创等优点,已广泛应用于软组织的美容、修复和重建。但是,糖尿病患者脂肪移植物保留率低,可能与长期处于高血糖状态,氧化应激、炎性细胞因子表达增加影响移植后移植物血运重建有关。目的:探究高血糖是否会通过影响脂肪移植物中血管内皮生长因子的表达,使移植物血管新生能力受损,进而影响移植物的保留率。方法:本实验采用组间对照,使用雄性健康SPF级SD大鼠48只,随机数表法均分为空白对照组与高血糖组,每组24只大鼠,高血糖组使用链脲佐菌素腹腔注射建立高血糖动物模型,空白对照组腹腔注射等体积柠檬酸缓冲液。取大鼠腹股沟区脂肪垫剪碎后注射移植于自身背部,于术后3d、7d、14d、21d每组各处死6只大鼠取出背部脂肪移植物,称量移植物体积,计算脂肪移植物保留率。一部分移植物固定于4%多聚甲醛溶液中行H&E染色观察移植物中囊肿及空泡出现情况、炎性细胞浸润、纤维化程度。CD31免疫组织化学染色观察新生血管数量;另一部分使用荧光定量PCR测定组织VEGF-mRNA表达水平,用ELISA试剂盒检测脂肪移植物中VEGF浓度。组间比较使用独立样本t检验,组内比较使用配对样本t检验,实验数据使用SPSS 19.0软件进行统计分析。结果:1、血糖变化与空白对照组比较,高血糖组大鼠在造模7天后出现明显多饮、多食、多尿症状,伴毛发枯黄、稀疏,皮屑增多,精神萎靡,活动量下降,空腹血糖较处理前升高,稳定维持于24.29±2.67mmol/L（P<0.05）;空白对照组未出现上述症状,生活习性未发生明显变化,空腹血糖与处理前相同（P>0.05）,提示糖尿病大鼠模型建立成功。2、体重变化脂肪移植术后,两组大鼠体重均出现下降,高血糖组体重下降速率较空白对照组快,至7d、14d、21d时体重下降较空白对照组大（P<0.05）。空白对照组大鼠体重在实验周期内波动较小,于术后14d时体重逐渐回升至术前水平;高血糖组体重在造模后开始持续下降,在脂肪移植术7d达到体重最低点,之后体重逐渐增减,但增幅较小。3、大体结果实验周期内各组大鼠均存活,未出现手术部位感染、红肿、破溃等改变。脂肪移植后各时间点均可见背部脂肪移植区皮下明显隆起,移植物与周围组织边界清晰,移植物呈淡黄色,可见血管长入,表面可见纤维组织包膜。部分高血糖组脂肪移植物组织包膜内可见少量空泡。4、移植物体积变化高血糖组脂肪移植物体积在术后3d、14d均大于空白对照组（P>0.05）。术后7d体积大于空白对照组（P<0.05）。在脂肪移植术后21d,空白对照组脂肪移植物体积大于高血糖组（P<0.05）。空白对照组脂肪移植物体积波动较高血糖组平缓。5、组织学高血糖组脂肪移植物炎症反应在术后3d、14d、21d较空白对照组严重（P<0.05）,并可在高血糖组中观察到比空白对照组更早、更广泛的炎性浸润,且炎性反应消退较空白对照组晚。脂肪细胞保留在术后14d、21d较空白对照组少（P<0.05）,组织纤维增生在术后14d、21d较空白对照组增多（P<0.05）,油囊和空泡数量在术后14d较空白对照组增加（P<0.05）。在移植物周边区,造模后3d、7d、14d、21d时高血糖组CD31阳染新生血管数量少于空白对照组（P<0.05）;在移植物中心区,造模后7d、14d、21d时高血糖组CD31阳染新生血管数量少于空白对照组（P<0.05）,3d时两组移植物中心均未观察到CD31阳染新生血管。6、VEGF浓度变化高血糖组VEGF浓度在脂肪移植术后3d、14d、21d表达量明显低于空白对照组（P<0.05）。两组脂肪移植物中VEGF的浓度均在术后3d时最高,之后各个时间点浓度逐渐下降,术后21d达到最低值。7、VEGF-mRNA相对表达变化高血糖组VEGF-mRNA表达在脂肪移植术后所有时间点始终低于空白对照组（P<0.05）。其中,高血糖组脂肪移植物中的VEGF-mRNA在术后7d表达最高。结论:高血糖可减少自体游离脂肪移植物中VEGF的表达,进而影响移植物中血管生成的数量,从而降低脂肪移植后保留率。
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