Hedgehog（Hh）信号通路是进化过程当中极度保守的信号通路，在脊椎动物的胚胎发育进程中起着极其重要调控作用，调控包括细胞增殖与分化、组织极化、和干细胞自稳态等过程。大量研究表明，Hh通路的异常与多种癌症的发生相关。FU蛋白作为信号通路中的一个丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，通过自磷酸化激活并介导Cos2和SUFU磷酸化释放出转录因子Ci155，活化的全长Ci155进入核内诱导下游目的基因的表达。而SUFU蛋白质是Hh信号通路中保守的负调控因子之一，SUFU蛋白质不仅与Gli/Ci结合来抑制Gli/Ci入核，SUFU和Gli复合物还可在桥接蛋白SAP18的辅助作用下，招募mSin3A组蛋白去乙酰化酶复合物，从而抑制Hh靶标基因的转录。通过分子克隆技术将SUFU，FU和SAP18构建到原核载体，在原核表达系统进行外源表达，采用亲和层析和分子筛层析对SUFU、FU和SAP18及其复合物进行纯化。利用非变性胶的方法进一步确定SUFU和SAP18蛋白之间的相互作用及结合比例。结果表明，SUFU和SAP18结合的摩尔比为1:1；通过分子筛亲和层析，可以获得高纯度、稳定的蛋白复合物，并已获得复合物晶体。另外，通过将FU和SUFU构建到双元表达载体上，我们在FU的N端鉴定出一个新的结合区域，为进一步复合物SUFU-FU的结构生物学研究奠定基础。