【摘 要】
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目的:通过观察线粒体ATP敏感的钾通道(mitoKATP)开放剂预处理在脑缺血再灌注损伤的大鼠模型中的作用,研究其在缺血再灌注后对线粒体功能以及细胞凋亡级联反应的影响.方法:以
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目的:通过观察线粒体ATP敏感的钾通道(mitoKATP)开放剂预处理在脑缺血再灌注损伤的大鼠模型中的作用,研究其在缺血再灌注后对线粒体功能以及细胞凋亡级联反应的影响.方法:以大脑中动脉栓塞(MCAO)模型和体外细胞氧化应激的模型为研究对象.32只成年健康雄性SD大鼠,随机分成四组:(1)假手术组(sham,n=8),行MCAO的手术操作过程,但不插线阻断大脑中动脉的供血;(2)脑缺血组(control,n=8),行MCAO手术,术前给予生理盐水;(3)二氮嗪组(diazoxide,n=8),行MCAO手术前30min给予二氮嗪5mg/kg i.p.;(4)5-HD组(5-HD,n=8),术前先给予5-HD 10mg/kg i.v.,15min后二氮嗪5.0mg/kg i.p.,30min后再行MCAO手术.各组大脑中动脉阻断2小时再灌注24小时后,应用Garcia评分法观察大鼠神经精神功能学的表现,TUNEL法检测细胞凋亡程度,透射电镜观察线粒体超微结构的变化,应用蛋白质印迹法观察线粒体细胞色素c从线粒体漏出到胞浆的变化,荧光标记法检测凋亡酶caspase-3的活性变化.通过荧光技术观察mitoKATP开放剂处理体外大鼠神经细胞的氧化应激模型(50μ MH2O2处理的大鼠脑单细胞悬液)后线粒体膜电位的变化.
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