【摘 要】
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病原微生物种类繁多,与人类生存有密切的联系。在生产上,微生物可以帮助人类提高生产。微生物可以产生各种各样的抗生素,帮助人类抵御疾病对人体健康的侵害。然而,某些致病性的微生物会导致水产养殖病害的发生,引起大量水产动物的死亡,造成巨大的经济损失。开发快速、高通量的致病微生物检测技术,是防治病原微生物灾害的前提。目前已有许多微生物检测技术集成到微生物自动检测设备当中,这是今后对病原微生物的定量研究,监测
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病原微生物种类繁多,与人类生存有密切的联系。在生产上,微生物可以帮助人类提高生产。微生物可以产生各种各样的抗生素,帮助人类抵御疾病对人体健康的侵害。然而,某些致病性的微生物会导致水产养殖病害的发生,引起大量水产动物的死亡,造成巨大的经济损失。开发快速、高通量的致病微生物检测技术,是防治病原微生物灾害的前提。目前已有许多微生物检测技术集成到微生物自动检测设备当中,这是今后对病原微生物的定量研究,监测微生物的组成和变迁的规律以及发展趋向,具有重大意义。目前成熟的商用微生物检测仪均以国外的产品为主,这些产品设备成本高昂,采购周期长,加上近年来国外对中国进行技术封锁,导致国内许多生产企业以及研发机构无法使用微生物自动检测设备。自主研发一款低成本、高效率且操作简单的微生物快速检测系统,对于防治致病微生物引起的水产养殖病害、降低经济损失具有十分重要的意义。基于以上需求,通过对当前微生物检测仪的检测原理比较,确定了基于光电检测的原理开发一款多温区和高通量的光电微生物检测系统。具体研究工作如下:(1)构建了多温区和高通量的光电微生物检测系统的检测模型。通过标准荧光探针(4-甲基伞酮)和显色染料(溴甲酚紫),构建基于荧光信号检测的微生物定性定量检测模型,以及基于分光光度法的微生物定性定量检测模型。(2)对多温区和高通量的光电微生物检测系统的功能需求梳理和总体设计。根据致病微生物检测技术集成仪器的需求出发,分别对荧光微生物检测仪和比色微生物检测仪的硬件电路设计、软件设计以及结构设计三个方面进行总体设计。在硬件和结构上要求设备具有2个测试温区,方便不同培养温度的微生物能同时进行测试,同时每个温区有16个相互独立的测试通道。在软件上要求操作简单的人机交互界面,无需培训即可上手操作。(3)搭建多温区和高通量的光电微生物检测系统。以水产病害中的大肠埃希菌和副溶血胡军作为模式菌,对微生物检测系统的精密度、样本线性、检测灵敏度进行测试,进而对整个微生物检测系统的性能进行评估。(4)多温区和高通量的光电微生物检测系统在实际应用中的准确性评估。使用所开发系统进对实际样本中的总大肠杆菌、大肠埃希菌和菌落总数进行检测。对比传统的平板计数法检测结果,评估多温区和高通量的光电微生物检测系统的准确性。通过实验证明了多温区和高通量的光电微生物检测系统是能够等效与传统的平板计数法,且检测效率更高,在水产病原微生物检测领域应用非常具有潜力。
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