【摘 要】
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目的:分离培养大鼠的Kupffer细胞和HSC,利用tanswell系统建立起HSC和Kupffer细胞的共培养体系,研究在共培养体系中,IL-10对与Kupffer细胞共培养的HSC激活的影响,阐明IL-10抗
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目的:分离培养大鼠的Kupffer细胞和HSC,利用tanswell系统建立起HSC和Kupffer细胞的共培养体系,研究在共培养体系中,IL-10对与Kupffer细胞共培养的HSC激活的影响,阐明IL-10抗肝纤维化的机制,为寻找抑制、阻止或逆转HSC活化的途径提供理论基础,为临床更好地防治肝硬化、门静脉高压症提供新思路和新方法.方法:采用肝脏离体胶原酶循环灌注消化和密度梯度离心的方法分离大鼠的Kupffer细胞,原代培养2-3天后使用latex-beads颗粒吞噬试验和溶菌酶(lysozyme)免疫细胞化学鉴定.本实验中使用的肝星状细胞来自本实验室建立的大鼠肝星状细胞系rHSC-99.利用transwell建立起这两种细胞的共培养体系,研究在共培养体系中Kupffer细胞对HSC激活的影响以及IL-10在其中所起的作用.使用western-blot和RT-PCR法检测两种在HSC激活中起关键作用的细胞因子TGF-β和PDGF及其部分下游信号分子的表达,观察HSC的增殖、分泌细胞外基质和激活的变化.结论:1、该研究建立HSC和KC的共培养体系,更好地模拟体内的实际环境.可作为肝硬化、门静脉高压症研究的工具.2、IL-10能够通过直接或间接的途径影响HSC的生物学活性,从而在肝硬化、门静脉高压症的发生发展中起了一定的作用.
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