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苦丁茶主产于广东、广西和海南，是当地民间传统的药用植物，历代中医文献对其功能多有记载，现代药理研究证明它具有多种药理活性和功效，临床应用前景乐观，作为一种新药开发具有很高的价值。本实验以三萜皂苷元含量为指标，通过单因素实验和正交试验确定其提取纯化工艺的最佳条件，从而为实现苦丁茶中三萜皂苷元的工业化生产提供了科学依据，具有一定的理论意义和应用价值。
1.采用薄层层析定性分析苦丁茶三萜皂苷元并优化确定了溶剂体系。甲苯：乙酸乙酯：冰醋酸(20:4:0.6)分离熊果酸；环己烷：氯仿：乙酸乙酯：甲醇(20:5:4:2)分离齐墩果酸，展开效果较好。采用此溶剂体系进行薄层层析有助于快速准确判断柱色谱分离。
2.建立了HPLC法同时测定苦丁茶中熊果酸和齐墩果酸含量的方法。色谱条件：色谱柱为KromasilC18(150×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇：水：冰醋酸(体积比85:15:0.2)，用微滤膜过滤后，超声脱气20min；柱温为室温；检测波长为220nm；流速为1mL/min；进样量为10μL。
3.确立了苦丁茶三萜皂苷元含量的分光光度分析法。以熊果酸为对照品，采用香草醛-冰醋酸-高氯酸比色法，检测波长为548nm，绘制标准曲线得回归方程为y=0.0068x+0.0039，相关系数为R2=0.9983。该方法具有较高的回收率，稳定性和精密度。采用此方法可对苦丁茶三萜皂苷元含量进行简便快速的测定。
4.在提取苦丁茶中三萜皂苷元的工艺过程中，分别进行了有机溶剂法，超声波强化有机溶剂法和酶法，通过正交试验确定了最佳提取工艺。结果如下，有机溶剂法：物料粒度40目，乙醇浓度95％，温度85℃，固液比1：12，提取2次，每次2h，三萜皂苷元得率为1.06％，纯度为19.2％；超声波强化有机溶剂法，超声功率175w，超声温度为60℃，超声时间30min，提取次数2次，三萜皂苷元得率为1.19％，纯度为17.2％；酶法：酶解pH为5.2，加酶量6mg/g，酶解温度50℃，三萜皂苷元得率为1.36％，纯度为21.3％。从结果可以看出：酶法提取得率及纯度均高于另外两种方法。
5.利用超滤技术对苦丁茶提取液进行了初步纯化处理。最佳工艺条件：选择截留分子量10000的超滤膜，压力0.1Mpa，提取液浓度0.4mg/mL；溶液pH值为中性。该方法有效地去除了色素、大分子物质和固体悬浮物。
6.利用不同pH条件下存在于提取液中各类物质的溶解性差异，采用酸碱沉淀法进一步纯化三萜皂苷元，最佳工艺条件为碱化pH值为11，酸化pH值为3，稀释倍数为1.5倍，得到的富集物纯度为36.2％，回收率为81.9％。
7.采用硅胶柱层析分离苦丁茶中的三萜皂苷元，通过单因素实验得到最佳层析条件：固定相为200-300目的硅胶，流动相为氯仿.甲醇体系，洗脱速度为1BV/h，通过柱层析，产品中三萜皂苷元的纯度由过柱前的的36％提高到65％。
8.创立了高速逆流色谱纯化分离苦丁茶中三萜皂苷元的工艺。选用溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水=4:2:3:1，上相做固定相，下相做流动相；主机转速800r/min，流速2mL/min，紫外检测波长254nm，固定相保留率68％。将0.1g粗产品进行HSCCC纯化后可以得到齐墩果酸0.03g，纯度为82.3％；熊果酸0.26g，纯度为85％。