益气化痰活血法对AS粘附分子的影响及其与血脂异常证候的相关性

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目的:1通过观察调脂通脉颗粒对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠血脂水平及血清粘附分子sICAM-1、sVCAM-1的影响,对小鼠主动脉弓AS斑块的影响,及对小鼠主动脉弓NF-k B、ICAM-1和LFA-1表达的影响,探讨调脂通脉颗粒调节血脂及干预AS的可能作用机制,为益气化痰活血法指导血脂异常及AS的治疗提供实验依据。2通过观察血脂异常患者中医证候类型与血脂水平、血清粘附分子的关系,研究血脂异常患者证候分布规律,并初步探讨将TC、TG、HDL-C、s ICAM-1. sVCAM-1等血清检测指标作为血脂异常中医辨证依据的可行性,为血脂异常的中医辨证论治提供新思路。方法:1动物实验部分将40只6周龄ApoE-/-雄性小鼠随机分为模型组、血脂康组、调脂通脉颗粒低、中、高剂量组,每组8只,予高脂饮食结合药物饲养;另取8只相同遗传背景的C57BL/6雄性小鼠作为对照组,予普通饮食饲养。各组小鼠饲养12周后处死,血清学检测血脂、sICAM-1、sVCAM-1变化;主动脉弓根部石蜡切片苏木素伊红(HE)染色及马松(Masson)染色观察组织形态学变化;另取主动脉弓根部石蜡切片,行免疫组织化学染色法观察NF-k B、ICAM-1及LFA-1表达。收集数据后采用统计学方法分析,观察调脂通脉颗粒对以上指标的影响。2临床研究部分筛选120例于北京中医药大学东直门医院及北京市房山区大安山乡社区卫生服务中心门诊就诊的患者,根据相应纳入、排除标准收集血脂异常患者,签署知情同意书,采集患者一般资料并填写用于证候研究的临床调查量表,留取患者静脉血,血清学检测血脂、sICAM-1及sVCAM-1水平,另收集20例正常人作为对照组,研究内容同血脂异常患者。收集数据后进行统计分析观察血脂异常患者与正常人各项指标的差异;观察血脂异常不同证候类型间各项指标的差异;探讨将以上检测指标作为中医辨证依据的可行性。结果:1血脂检测表明,模型组、血脂康组、调脂通脉颗粒各组小鼠血清TC、LDL-C. HDL-C水平高于正常对照组;模型组、调脂通脉颗粒低剂量组TG水平高于正常对照组;调脂通脉颗粒中、高剂量组、血脂康组TG水平低于模型组。2ELISA法检测表明,调脂通脉颗粒各组、血脂康组、模型组小鼠血清sICAM-1、 sVCAM-1水平高于正常对照组;调脂通脉颗粒高剂量组血清sICAM-1、sVCAM-1水平低于模型组。3HE染色、Masson染色可见,对照组主动脉内膜光滑未见粥样斑块形成;模型组主动脉内膜增厚伴易损斑块形成;血脂康组及调脂通脉颗粒高剂量组内膜增厚伴稳定斑块形成。4免疫组化染色表明,模型组、血脂康组、调脂通脉颗粒各组主动脉弓NF-k B、ICAM-1及LFA-1表达高于正常对照组。调脂通脉颗粒高剂量组主动脉弓NF-k B、ICAM-1及LFA-1表达低于模型组。5临床研究发现,血脂异常患者证候分布比例由高到低依次为:肝肾阴虚组(40.83%)>阴虚阳亢组(25.83%)>痰浊阻滞组(20.83%)>脾肾阳虚组(8.33%)>气滞血瘀组(4.17%)。6各证候类型的血清TC水平由高到低依次为:气滞血瘀组>肝肾阴虚组>痰浊阻滞组>阴虚阳亢组>脾肾阳虚组>正常对照组。肝肾阴虚组、痰浊阻滞组、阴虚阳亢组及气滞血瘀组血清TC水平高于正常对照组。气滞血瘀组TC水平明显高于肝肾阴虚组及阴虚阳亢组。7各证候类型的血清TG水平由高到低依次为:痰浊阻滞组>阴虚阳亢组>肝肾阴虚组>脾肾阳虚组>气滞血瘀组>正常对照组。痰浊阻滞组及阴虚阳亢组TG水平高于正常对照组。痰浊阻滞组血清TG水平明显高于阴虚阳亢组。8各证候类型的血清HDL-C水平由低到高依次为肝肾阴虚组<正常对照组<阴虚阳亢组<脾肾阳虚组<痰浊阻滞组<气滞血瘀组,组间比较无差异。9血脂异常患者血清sICAM-1水平高于正常人,各证候类型血清sICAM-1水平由高到低依次为:阴虚阳亢组>肝肾阴虚组>脾肾阳虚组>痰浊阻滞组>气滞血瘀组>正常对照组。各证候组的血清sICAM-1水平均较正常对照组升高,但各证候组间无差异。10血脂异常患者血清sVCAM-1水平高于正常人,各证候类型血清sVCAM-1水平由高到低依次为:肝肾阴虚组>痰浊阻滞组>阴虚阳亢组>脾肾阳虚组>气滞血瘀组>正常对照组。各证候组的血清sVCAM-1水平均较正常对照组升高,但各证候组间无差异。结论:1以益气化痰活血法为指导的调脂通脉颗粒可在一定程度上缓解AS病理学改变,这可能与其降低血清TG、sICAM-1及sVCAM-1水平,抑制NF-kB. ICAM-1及LFA-1在斑块处的表达有关,抑制粘附分子及相关炎性因子表达可能是调脂通脉颗粒防治AS的作用机制之一。2肝肾阴虚证、阴虚阳亢证及痰浊阻滞证是血脂异常患者的重要证候类型,脾肾阳虚证出现较少,气滞血瘀证比例最少。3血脂异常患者的血清TC水平升高与气滞血瘀证密切相关;血清TG水平升高与痰浊阻滞证联系紧密;可考虑将其作为相应证候类型的辨证依据。4血脂异常患者的血清sICAM-1及sVCAM-1水平明显高于正常人,提示血脂异常早期阶段就已发生与AS相关的血管炎性反应。但本研究中未观察到其差异与不同证候类型存在相关性,暂不考虑将其作为辨证依据。
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