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MYB转录因子是植物中重要的一类转录因子,在植物生长发育及胁迫应答中发挥重要作用。番茄(Solanum lycopersicum)是对干旱和盐胁迫敏感作物,番茄SlMYB1R-1基因属于MYB-related亚家族。目前,有关MYB-related亚家族在番茄干旱和盐胁迫耐受性的报道较少,通过对目的基因的研究,可以对番茄植株在逆境下的生长发育,及相关基因的调控奠定基础。本论文以Micro-Tom番茄为材料,初步探讨SlMYB1R-1基因在响应盐和干旱胁迫的功能。从番茄基因组中分离出Sl MYB1R-1基因,通过生物信息学方法分析SlMYB1R-1基因结构和蛋白功能域,构建MYB家族基因的系统进化树;研究SlMYB1R-1基因的时空表达模式;构建SlMYB1R-1基因RNAi干扰载体和超表达载体,转化番茄,获得转基因株系;通过启动子原件分析、激素和非生物胁迫处理,分析SlMYB1R-1基因的表达模式;通过表型分析及相关基因定量检测,以及对SlMYB1R-1转基因植株可溶性蛋白和MDA的含量测定,初步探究该基因在非生物胁迫中的功能。主要研究内容和结果如下:(1)通过生物信息学方法分析番茄的基因组,找到SlMYB1R-1基因的cDNA序列,基因结构分析发现SlMYB1R-1编码框1523 bp,含有3个外显子2个内含子,编码302个氨基酸。通过氨基酸序列比对,发现该基因含有一个保守的MYB重复序列,属于MYB-related亚家族。进化分析发现其与马铃薯中的StMYB1R-1同源性较高。(2)通过对SlMYB1R-1启动子分析,发现该区域存在脱落酸、乙烯及许多逆境相关的响应元件。我们分析了SlMYB1R-1基因在非生物胁迫和激素(NaCl、PEG、ABA、Eth、KT、IAA和SA)处理后的响应模式,发现在盐和干旱胁迫后,在根和叶片两种组织中SlMYB1R-1基因的表达量显著上调,与叶相比根对胁迫响应更敏感。在不同激素处理下,发现目的基因的转录水平受到Eth和KT的调控。以上结果表明目的基因可能参与番茄对激素信号和非生物胁迫的调控。(3)为了进一步研究SlMYB1R-1基因在番茄生长发育中的作用,分别取野生型番茄的不同组织,qRT-PCR分析该基因的时空表达模式。结果显示,SlMYB1R-1基因在根、茎、叶、花、开花当天、开花后10 d、开花后20 d、绿果、破色果实、橙色果和红果组织中均有表达,但在根、叶及开花后10 d的表达量较高。(4)利用GUS染色、qRT-PCR方法对转基因株系进行鉴定,获得阳性干扰株系。在盐和干旱胁迫下,转基因株系的种子萌发率提高、耐旱性提高,与野生型相比转基因植株的叶片较绿植株生长更健康。表明SlMYB1R-1基因可能参与植物的干旱及盐胁迫响应过程。(5)qRT-PCR检测与非生物胁迫相关基因的表达(CAT、SOD、GST、POD、LOX和APX),CAT、LOX和PR1这三个基因在RNAi干扰株系中的表达量明显高于WT。定量结果说明目的基因可能参与非生物胁迫响应。(6)测定RNAi干扰株系在逆境胁迫下的生理指标,发现与野生型相比,转基因株系的可溶性蛋白含量显著上调,而MDA的含量显著下降。RNAi干扰株系中可溶性蛋白和MDA的含量进一步说明了SlMYB1R-1基因在非生物胁迫响应中发挥重要作用。以上结果表明SlMYB1R-1基因可能调控番茄对干旱和盐胁迫的响应,在非生物胁迫中发挥负调控作用。可以作为一个有用的抗逆基因资源,为作物的遗传改良提供借鉴。