淡豆豉提取物对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制研究

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目的:淡豆豉是由黑大豆的成熟种子经蒸罨,与辅料桑叶、鲜青蒿发酵而成的传统中药,具有解表除烦、宣发郁热的功效;我们前期研究发现淡豆豉具有降糖作用,为进一步评价其对2型糖尿病胰岛素抵抗的改善作用,本研究采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,观察淡豆豉提取物对胰岛素抵抗大鼠肝细胞膜胰岛素受体(InsR)mRNA表达及其它相关生化指标的影响,探讨其改善胰岛素抵抗的可能机制。方法:Wistar大鼠高糖高脂饮食饲喂4周加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型。另取10只做为正常对照组,饲喂常规饲料,腹腔注射柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。检测造模大鼠血糖,选取血糖值>7.7 mmol·L-1的大鼠40只用于实验,将其按血糖随机分为4组,分别为模型对照组、淡豆豉高剂量组(20 g生药/kg)、淡豆豉低剂量组(10 g生药/kg)及阳性药罗格列酮组(1.8 mg/kg),每组10只。药物干预8周后,测定大鼠糖耐量(GTT);取大鼠血清测定空腹血糖(FPG)、空腹血清胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(GHb)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA),计算胰岛素敏感指数(ISI);取胰腺组织HE染色观察形态学改变;RT-PCR方法检测肝细胞膜胰岛素受体(InsR)mRNA的表达水平。实验数据以X士S表示,用SPSS11.5软件进行分析。结果:1对IR大鼠葡萄糖耐量试验(GTT)的影响各组大鼠腹腔注射葡萄糖0.5小时血糖值(BG)即达到高峰。模型对照组0、0.5、1、2小时4个时间点BG及血糖曲线下面积(AUC)均较正常对照组显著升高(P<0.01);淡豆豉高剂量组及阳性药罗格列酮组4个时间点BG及AUC均较模型对照组显著降低(P<0.01),淡豆豉低剂量组0、1、2小时3个时间点BG及AUC均较模型对照组显著降低(P<0.05),但0.5小时BG与模型对照组比较无明显差异(P>0.05)。2对IR大鼠空腹血糖(FPG)和糖化血红蛋白(GHb)的影响模型对照组FPG和GHb均较正常对照组显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,淡豆豉高、低剂量组FPG和GHb均显著降低,并具有一定的剂量依赖关系(P<0.05或P<0.01),以高剂量组为佳;阳性药罗格列酮组FPG和GHb亦显著降低(P<0.01)。3对IR大鼠空腹血清胰岛素(FINS)和胰岛素敏感指数(ISI)的影响与正常对照组比较,模型对照组FINS显著升高(P<0.01);ISI显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,各给药组FINS均显著降低(P<0.01),ISI均显著升高(P<0.01)。4对IR大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响模型对照组TNF-α较正常对照组显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,各给药组TNF-α均显著降低(P<0.01)。5对IR大鼠超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响与正常对照组比较,模型对照组SOD显著降低(P<0.01),MDA显著升高(P<0.01)。与模型对照组比较,淡豆豉高、低剂量组SOD均显著升高,MDA均显著降低,并具有一定的剂量依赖关系(P<0.05或P<0.01),均以高剂量组为佳;罗格列酮组SOD亦显著升高(P<0.01),MDA亦显著降低(P<0.01)。6对IR大鼠胰腺组织形态学的影响与正常对照组比较,模型对照组胰岛细胞数量显著下降,体积缩小,部分胰岛细胞胞浆空泡变性,细胞核固缩;与模型对照组比较,淡豆豉高、低剂量组及罗格列酮组胰腺组织较为完好,岛形饱满,境界清晰,胰岛细胞数量明显增多,空泡明显减少,体积较正常,以高剂量组和罗格列酮组为佳。7对IR大鼠肝细胞膜胰岛素受体InsR mRNA表达量的影响模型对照组较正常对照组肝细胞膜InsR mRNA表达量显著降低(P<0.01)。与模型对照组比较,各给药组InsR mRNA表达量均显著升高(P<0.01)。结论:淡豆豉提取物能够增加高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素所致的2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠葡萄糖耐量,降低空腹血糖、糖化血红蛋白及空腹血清胰岛素水平,增加胰岛素敏感指数,保护胰岛β细胞,提高胰岛素敏感性,改善糖代谢,具有一定的改善胰岛素抵抗作用,其机制可能为:1上调肝细胞膜胰岛素受体(InsR)mRNA表达量;2降低血清肿瘤坏死因子-α水平;3升高血清超氧化物歧化酶水平、降低丙二醛水平,对抗氧化应激。
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