【摘 要】
：
该文运用基因工程技术获得了一种人的热休克蛋白hgp96,首选构建了原核融合表达载体,并对表达条件进行了优化,最后运用层析技术对目的蛋白进行纯化.对构建的原核融合表达载体P
论文部分内容阅读
该文运用基因工程技术获得了一种人的热休克蛋白hgp96,首选构建了原核融合表达载体,并对表达条件进行了优化,最后运用层析技术对目的蛋白进行纯化.对构建的原核融合表达载体PET-hgp96进行测序和酶切鉴定,证明获得了hgp96的表达质粒;将表达质粒转入表达菌体,用IPTG进行诱导,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫学分析证明,目的蛋白得以表达,接下来摸索了高效表达条件:表达载体为PET30a,培养基为TB,表达大肠杆菌菌株为B121(DE3),诱导前菌浓度OD<,600>为0.6左右,IPTG诱导的终浓度为1m mol/L,诱导时间为4小时,目的蛋白以可溶性形式表达菌体细胞内且其表达量占菌体总蛋白的10﹪左右;通过亲和层析和离子交换层析两步纯化了目的蛋白,为去除70KD的杂蛋白,向纯化缓冲液中加入3mol/L尿素,结果,目的蛋白的最终纯度达90﹪以上,且其最后得率为1L菌可得大约4mg目的蛋白.
其他文献
芦荟属百合科草本植物,长期应用实践和研究均证明,芦荟的治疗效果和功能是新鲜芦荟中各种成分共同协调作用所致,单一成分的效果则显得很小,特别是暴露于空气中的芦荟凝胶极易
随着近来数值方法、湍流燃烧模型的发展以及计算机计算能力的不断提高,使得大涡模拟(LES)广泛应用于燃气轮机燃烧室数值计算中,本文提出了一种用于真实LPP燃烧室的LES数学模
低次烤烟叶蛋白质含量高,香气成分不足,辛辣刺激性大,在卷烟产品设计时不能用于中高档卷烟配方中,只能用于没有效益的低档卷烟,甚至被卷烟企业弃之不用,占用大量资金和库房.
该文研究了丹贝异黄酮的最佳提取方法,丹贝异黄酮提取物(TIE)的食用安全性特点 以及它的抑制肿作用,结果如下:1、丹贝异黄酮的最佳提取方法是:70％的乙醇在温度80
为培养合格的新工科专业人才,适应当前社会对车辆工程专业毕业生的需求升级,基于OBE(Outcome based education,成果导向教育)理念对专业的主干课汽车设计课程进行教学改革.通
该课题旨在将多球练习方法引入高校网球专业选修课的教学过程中,重点在于通过教学实验,获取翔实的实验数据,以验证多球练习法在教学过程中的重要作用,从而为以后多球练习法在
该论文在查阅了国内外最关于废水培养螺旋藻的培养基,研究了螺旋藻在啤酒废水中中段废水中的营养生长机理.同时通过用废水培养螺旋藻来治理啤酒废水进行了研究.另外,把该实验
作为内燃机工作的核心,喷雾燃烧过程的优劣决定了内燃机的热效率以及排放。喷雾碰壁以及附壁油膜的形成作为内燃机喷雾过程中不可避免的一种现象,对内燃机的性能及排放有着非
该论文以常见的绿叶菜大白菜、小白菜、小油菜、菠菜、芹菜为试材,依据NO与二苯胺在酸性介质(浓硫酸)中的显色反应,设计了一种建立在目视比色法基础之上、进行比色的一种快速