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实验目的:氰化物是外军重点装备的化学战剂,可用于各种环境的战场。但不同的战场环境对氰化物的毒性作用有一定的影响。我们的前期研究业已证实,在高原缺氧环境下,氰化物对实验动物的毒性增加,其临床表现、救治方法与常态环境下氰化物中毒有所差异。寒冷也是一种常见的特殊环境。未来局部战争中在寒冷环境中使用氰化物作战的可能性很大。本项目拟在前期工作的基础上,以NaCN作为氰类毒物代表,以人工低温冰柜模拟寒冷环境,建立低温环境氰中毒动物模型,以心、肝、肾功能为观察指标,检测不同温度环境下氰中毒动物心、肝、肾功能的变化规律,初步探讨低温暴露复合氰中毒对动物机体功能的影响。并在此基础上探讨4-DMAP在救治低温环境氰化物中毒时的救治效果。这些工作的开展,将为特殊环境下氰化物中毒增加新的认识,也为特殊环境下氰化物中毒的救治方案提供重要依据,对于提高我军低温环境下化学武器袭击的应对水平具有重要意义。实验方法:1.以人工低温冰柜模拟寒冷环境,建立低温环境氰中毒动物模型。低温实验柜由本实验室用海尔冰柜加装电子温度控制器改制而成,设20℃为对照组、2℃、-20℃等应用温度点,温度误差小于0.5℃。2.以日本大耳白兔为实验对象,按随机数字表法将其分为6组,即20℃、2℃、-20℃、2℃+NaCN、-20℃+NaCN,2℃+NaCN+4-DMAP组,每组各5只。动物麻醉后常规手术,颈动脉插管,建立取血通道,置实验环境中适应60min。为实验组动物腹腔注射NaCN2.0mg/kg,治疗组动物腹腔注射氰化钠(2.0mg/kg)后,立即肌肉注射4-DMAP(3.2mg/kg)。于第0、30、60、90、120min时间点从左侧颈总动脉抽取动脉血5mL,离心分离动脉血血浆(4℃,2000r/min,离心10min),-80℃超低温冰箱冻存。3.利用HITACHI公司生产的日立7020型全自动生化分析仪,使用四川迈克生物科技公司生产的试剂盒测定心肌酶、肝、肾功能各项生化指标,观察各组实验动物心、肝、肾功能的各项生化指标变化情况。实验结果:1.温度下降,家兔心肌酶CK、CK-MB、LDH、α-HBDH等指标呈现与温度值相反、与暴露时间相同方向的变化。即温度下降各指标升高,暴露时间延长,各指标变化剧烈。比较2℃和-20℃暴露家兔血液心肌酶变化情况可以发现,-20℃时各指标的变化程度下降,但与暴露时间的延长同样呈正向关系。低温暴露复合NaCN中毒时,家兔血浆心肌酶指标比单独低温暴露时增加更明显。于中毒60min,-20℃时CK-MB为1010.20±122.4、 CK为1067.60±99.95、 LDH为191.20±17.66(U/L)、 HBDH为126.40±19.54;-20℃暴露复合氰化钠中毒动物,上述指标分别为1659.60±102.71、2632.80±244.63、395.40±38.61(U/L)和222.00±19.34,分别是-20℃时CK-MB的1.64倍、CK的2.46倍、LDH的2.07倍、HBDH的1.76倍。2.温度下降,家兔肝功能AST、ALT、ALP各指标升高,暴露时间延长,各指标变化更剧烈。低温暴露复合NaCN中毒时,家兔血浆肝功能指标比单独低温暴露时增加更明显。于中毒60min,-20℃时AST为47.20±4.30、ALT为53.20±5.63、ALP为165.80±14.45(U/L);-20℃暴露复合氰化钠中毒动物,上述指标分别为273.40±14.90、67.00±6.81和277.40±17.64(U/L),分别是-20℃时AST的5.79倍、ALT的1.26倍、ALP的1.65倍。3.温度下降,动物肾功能BU、CREA指标升高。暴露时间延长,各指标变化更明显。低温暴露复合NaCN中毒时,家兔血浆肾功能指标BU、CREA、UA比单独低温暴露时增加更明显。于中毒60min,-20℃时BU为10.58±1.06、CREA为87.20±8.64、UA为10.40±0.77(U/L);-20℃暴露复合氰化钠中毒动物,上述指标分别为11.68±1.24、103.20±10.91和132.00±9.17(U/L),分别是-20℃时BU的1.10倍、CREA的1.18倍、UA的14.6倍。4.4-DMAP治疗后,家兔心、肝、肾功能各项指标均明显低于未经治疗的2℃氰中毒组,且4-DMAP作用时间越长,各指标降低越显著。于治疗60min,与未经治疗的2℃氰中毒组心、肝、肾功能各项指标相比,4-DMAP治疗后2℃氰中毒组的CK、CK-MB、LDH、α-HBDH、AST、ALT、ALP、BU、CREA分别为未经治疗2℃氰中毒组的42.96%、50.87%、56.94%、32.66%、44.64%、76.37%、49.72%、67.83%、76.67%。结论:1.低温暴露明显影响家兔血液心肌酶含量、肝功能指标和肾脏功能主要指标。暴露时间越久,影响越大。2.低温暴露动物复合氰化钠中毒时,上述家兔心、肝、肾功能指标变化更加剧烈。提示低温暴露和氰化钠中毒对家兔心、肝、肾功能有联合效应。3.低温暴露复合氰中毒时,4-DMAP可缓解低温暴露复合氰中毒对心、肝、肾功能的损伤作用。