【摘 要】
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天山雪莲是一种多年生草本植物,素有“百草之王”和“药中极品”的美称,是十分珍贵的中药资源,近年来,人们利用生物技术培育出天山雪莲细胞培养物,经研究表明,雪莲细胞培养物中富含咖啡酰奎尼酸(Caffeoyl Quinic Acid,简称“CQA”)类物质,具有降血脂、抗肥胖的生物活性,但其作用机理尚不明确,本研究以雪莲细胞培养物中提取、纯化的CQA类物质为对象,通过消化酶体外抑制活性实验和高脂喂养大鼠
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天山雪莲是一种多年生草本植物,素有“百草之王”和“药中极品”的美称,是十分珍贵的中药资源,近年来,人们利用生物技术培育出天山雪莲细胞培养物,经研究表明,雪莲细胞培养物中富含咖啡酰奎尼酸(Caffeoyl Quinic Acid,简称“CQA”)类物质,具有降血脂、抗肥胖的生物活性,但其作用机理尚不明确,本研究以雪莲细胞培养物中提取、纯化的CQA类物质为对象,通过消化酶体外抑制活性实验和高脂喂养大鼠肥胖抑制实验,对CQA类物质的抗肥胖作用机理进行初步探究,得到以下结论:(1)对雪莲细胞培养物中的CQA类物质进行提取纯化,经水提法粗提,大孔吸附树脂和制备液相纯化,最终得到纯化后的CQA类物质,占其干重的3.5±0.75%。(2)对CQA类物质进行α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶和猪胰脂肪酶体外抑制实验,结果显示随着样品中CQA类物质终浓度的提升,对消化酶的抑制率逐渐提高,呈正相关趋势,当CQA类物质的终浓度达到1.5 mg/ml时,对α-葡萄糖苷酶,猪胰脂肪酶的抑制率可以达到95.38%,97.1%;当其终浓度达到2.25 mg/ml时,对α-淀粉酶抑制率达到95.86%。(3)对高脂饲养大鼠的抗肥胖作用进行研究,结果显示,雪莲细胞培养物中CQA类物质可以有效降低高脂饲养大鼠的体重、Lee’s指数,肝重、附睾脂肪系数,降低其血清和肝匀浆中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、脂肪酶(LPS)水平,提高高密度胆固醇(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平,从而起到调节脂肪代谢紊乱,减低脂质过氧化物生成,提高抗过氧化物生成,减少高脂喂养大鼠脂肪吸收、堆积作用。(4)运用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测CQA类物质对高脂喂养大鼠脂肪代谢关键酶基因的表达水平,结果显示,雪莲细胞培养物中CQA类物质能够降低脂肪酸合成酶(FAS)、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-COA)的表达水平,提高过氧化物增值激活物受体-α(PPARα)水平、激活胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)表达,从而起到抗肥胖的作用。
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