氧合血常温体外持续灌注对供肺保存效果的动物实验研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shelllbw
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目的 研究不使用呼吸机、氧合血常温经肺动脉持续灌注对离体猪肺的保护作用,并探讨肺缺血再灌注损伤与细胞凋亡的相关性。为临床较长时间保存供肺并可长途运输提供实验依据。方法采用健康纯种的广西巴马小香猪24只,随机分为两组,分别制备双肺离体温血灌注模型和冷缺血模型,即:实验组(不使用呼吸机、氧合血常温经肺动脉持续灌注8h保存供肺,n=12)和对照组(Celsior液经肺动脉灌注后于4℃深低温保存供肺8h,n=12。供肺保存8h后行左肺移植手术,术后机械通气24h。检测肺含水量、左下肺静脉血氧分压(LIPV-PCO2)、肺通气阻力(LR)等指标评估肺功能;HE染色光镜下观察行肺组织水肿分‘级并计数肺泡细胞死亡率,评估肺组织损伤程度。通过TUNEL法结合透射电镜观察来阐述肺泡细胞凋亡水平、凋亡的肺泡细胞类型及凋亡趋势;结果1.肺功能检测:术后各时间点比较,实验组肺含水量、LR显著低于对照组,LIPV-PCO2显著高于对照组(P<0.05),实验组肺功能显著优于对照组;实验组术后24h肺含水量、LR反而显著低于术后12h,LIPV-PCO2显著高于术后12h(P<0.05);2.HE染色观察:实验组各时间点肺组织损伤较对照组轻;对照组肺组织损伤术后24h最为严重,70%-80%肺泡腔出现不同程度水肿或出血,甚至大片间质出血、坏死。实验组于术后12h最为严重,20-30%肺泡腔出现水肿液,局部肺泡腔及肺间质出血,且于12h后有好转趋势。肺泡细胞死亡率:实验组各时间点显著低于对照组(P<0.05);对照组肺泡细胞死亡率逐渐增加,术后24h达32.7±4.6%;实验组术后肺泡细胞死亡率于术后12h达最高15.8±2.1%。3. Tunel检测:实验组肺泡细胞凋亡率各时间点显著低于对照组(P<0.05),实验组术后6h达最高为8.2±1.5%,术后24h肺泡细胞凋亡率显著低于术后6h(P<0.05);术后24h内肺泡细胞凋亡率与肺含水量、LR呈正显著相关(r分别为0.890、0.918,P<0.05),与LIPV-PCO2呈负显著相关(r为-0.784,P<0.05);4.透射电镜观察:凋亡肺泡细胞以AECⅡ为主,约占80%。实验组各时间肺泡细胞凋亡水平低于对照组,且凋亡上升趋势更早得到控制。结论:1.氧合血常温经肺动脉持续灌注供肺保存方式能有效减轻LIRI,使猪肺移植术后肺功能得到改善,其供肺保存效果明显优于“低温静态保存”方式。2.肺移植术后早期(24h内),肺泡细胞凋亡率与LIRI有着显著的相关性,凋亡水平越高,LIRI损伤程度越严重。且凋亡主要肺泡细胞类型为AECⅡ。3.温血灌注保存方式可能通过降低肺泡细胞凋亡水平,减少LIRI,起到供肺的保护作用。
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