RNA干涉技术沉默USP22基因抗人结直肠癌的体内实验研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pjpdl6123475
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目的:探讨RNA干涉技术沉默USP22基因抗人结直肠癌的效应,为结直肠癌的基因治疗提供有效靶点及技术。   方法:以基因重组技术构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miRNA-USP22重组质粒;应用真核细胞转染技术转染人结直肠癌细胞株HCT116进行体外研究,观察USP22对结直肠癌细胞的活力、细胞周期和凋亡的影响,以及其对MVP耐药基因的调节作用;建立裸鼠大结直肠癌皮下移植瘤模型,采用瘤内注射联合电转染法将重组质粒导入裸鼠移植瘤内观察抑瘤作用。   结果:成功构建pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miRNA-USP22重组质粒。体外实验证明重组质粒对人结直肠癌细胞具有增殖抑制、细胞周期G0/G1期阻滞及促进凋亡的作用,并且显著抑制了MVP耐药基因的表达。体内实验证明重组质粒具有抑制裸鼠人结直肠癌皮下移植瘤生长的作用。   结论:USP22参与结直肠癌细胞的发生发展过程,USP22高表达可促使癌细胞更具侵略性和转移性。USP22在肿瘤于细胞致肿瘤产生耐药性的机制中可能是通过上调耐药基因MVP来实现的。USP22基因可作为结直肠癌基因治疗的新的有效靶点。
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