目的：　　本实验通过体外培养猪卵巢颗粒细胞，采用ERK抑制剂PD98059【1】处理，导致颗粒细胞雄激素增多，并从雄激素生成关键酶CYP17及其调控因子c-Fos与主要信号转导途径（MAPK）来研究养精种玉汤有效成分降低卵巢源性雄激素生成的分子机制。　　方法：　　1.猪卵巢颗粒细胞的提取　　选取直径小的和中等大小的未成熟卵泡，用1ml注射器刺破卵泡吸出卵泡液，将含有颗粒细胞的卵泡液放入含有生理盐水的15ml离心管中，加入淋巴细胞分离液，离心，细胞分为3层，取中间层细胞并将其加入培养基中，反复吹打，使之分散。　　2.ERK抑制剂最适宜浓度的摸索　　将获取的颗粒细胞在培养24小时后，颗粒细胞在不同浓度的ERK抑制剂作用24小时后检测睾酮，取得最佳浓度的ERK抑制剂；颗粒细胞在最佳浓度的ERK抑制剂作用不同时间后检测睾酮，获得最佳作用时间。　　3.观察ERK信号通路对c-Fos、CYP17和睾酮的影响　　上述ERK抑制剂刺激颗粒细胞，western blot测定各组c-Fos与CYP17蛋白表达情况。以确定ERK、c-Fos、CYP17和睾酮的关系。　　4.利用siRNA技术干扰GC中的c-Fos　　通过RNA干扰技术降低正常猪卵巢GC上c-Fos的表达，观察CYP17及睾酮（T）的变化，以确定c-Fos与CYP17的关系及c-Fos与睾酮的关系。　　5.养精种玉汤有效部位调节雄激素的分子机制　　养精种玉汤有效成分正丁醇和乙酸乙酯提取物刺激已被ERK抑制作用的颗粒细胞，测定各组ERK、c-Fos、 CYP17和睾酮的变化。　　6.统计学方法：所有数据均以均数±标准差（x__±s）,采用SPSS17.0统计软件进行t检验。P<0.05表示具有统计学差别。PD98059刺激颗粒细胞对睾酮影响的结果数据用GrahPad Prism5.0进行拟合。Western blot采用Image J进行图像分析。　　结果：　　1.颗粒细胞24小时内贴壁生长。　　2.ERK抑制剂浓度为10uM及作用时间为24h时睾酮和CYP17升高的最明显，并且ERK抑制剂作用于颗粒细胞后c-Fos的表达降低。　　3.采用siNRA干扰c-Fos后，CYP17的表达升高。　　4.养精种玉汤有效成分正丁醇和乙酸乙酯提取物作用于已受ERK抑制剂刺激的颗粒细胞后，ERK1/2和c-Fos的表达升高，CYP17和睾酮的表达降低。　　结论：　　1.c-Fos对CYP17有抑制作用。　　2.颗粒细胞雄激素生成抑制途径可能是ERK/c-Fos/CYP17。　　3.养精种玉汤有效成分正丁醇和乙酸乙酯提取物可能通过ERK/c-Fos/CYP17途径抑制雄激素的生成，从而为养精种玉汤有效治疗PCOS高雄激素血症提供了实验依据。