顺铂(CDDP)是一种临床最常用的广谱抗肿瘤药物,和其他药物联合使用可以显著改善包括NSCLC、SCLC在内的多种癌症的预后。CDDP还是一种放疗增敏剂,广泛用于中晚期NSCLC等肿瘤患者的局部放疗增敏。然而CDDP缺乏靶向性,在杀伤肿瘤细胞的同时,对正常细胞也有较明显的毒副作用,并且同步放化疗中CDDP增加疗效的同时,毒副反应也相应增加。解决这种缺陷的方法之一,是构建新型纳米载药系统。聚合物胶束具有高水溶性,高药物装载率,低毒性等优点,并有肿瘤靶向作用,包括被动靶向(如EPR效应)和主动靶向,即在胶束表面结合肿瘤靶向分子如叶酸基团,与肿瘤组织中高表达的特异性受体结合,递送药物到肿瘤部位。本研究自行合成了含有叶酸靶向基团的聚乙二醇枝接聚天冬氨酸聚合物胶束顺铂载体(FA-PEG-g-PAsp-CDDP)和无叶酸靶向基团的mPEG-g-PAsp-CDDP,以CDDP为对照,通过比较这三种药物对肺癌细胞SPC-A-1体外的细胞毒性以及单独用药和同步放疗对裸鼠移植瘤的生长抑制作用,验证FA-PEG-g-PAsp-CDDP的肿瘤抑制和辐射增敏效果,并评价其近期毒性,为顺铂聚合物胶束的临床应用提供实验基础和理论依据。方法：1.在DCC/TEA的帮助下,NH2-PEG-NH2与叶酸的γ羧基反应得到FA-PEG-NH2。将反应产物溶于DMF,与PSI发生部分开环反应,得到FA-PEG-g-PSI。接着L-天冬氨酸在三乙胺的水溶液中继续开环PSI,得到顺铂载体FA-PEG-g-PAAsp。在纯水中CDDP与FA-PEG-g-PAAsp通过离子键结合得到最终产物FA-PEG-g-PAsp-CDDP。mPEG-g-PAsp-CDDP也通过类似的路线合成。2.聚合物胶束的表征：ICP-AES检测胶束中的金属铂含量,UV-vis检测叶酸含量,DLS检测胶束的粒径、分布和ζ电位,TEM观察胶束的形态。3.利用CCK-8细胞毒性试验方法比较FA-PEG-g-PAsp-CDD、 mPEG-g-PAsp-CDDP和CDDP对高表达叶酸受体的人肺腺癌细胞株SPC-A-1的细胞毒性作用。4.构建SPC-A-1细胞的荷瘤裸鼠模型,56只荷瘤裸鼠随机分为8组,4组用于单独用药实验,4组用于同步放化疗实验。比较上述三种药物单独用药和同步放疗对裸鼠移植瘤的生长抑制及放射增敏作用,观察并比较用药对裸鼠体重的影响。5.30只ICR小鼠随机分为3组,分别给予FA-PEG-g-PAsp-CDDP、 mPEG-g-PAsp-CDDP和CDDP,以CDDP半数致死剂量11mg/kg单次尾静脉给药,7天后观察小鼠生存情况。结果：1.成功合成聚合物胶束FA-PEG-g-PAsp-CDDP和mPEG-g-PAsp-CDDP.2. FA-PEG-g-PAsp-CDDP的CDDP载药量为15.2%,叶酸含量为9.59%,mPEG-g-PAsp-CDDP的CDDP载药量为17.9%。两种胶束的直径均在100nm左右,且分布均匀,均带负电荷。在TEM下FA-PEG-g-PAsp-CDDP显示为核／壳结构。3.含过量叶酸的普通培养基中FA-PEG-g-PAsp-CDDP和mPEG-g-PAsp-CDDP的细胞毒性作用相似,而在不含叶酸培养基中FA-PEG-g-PAsp-CDDP的细胞毒性高于mPEG-g-PAsp-CDDP, IC50约为后者的1/3(P<0.01)。在体外实验中CDDP的肿瘤抑制效果显著高于两种聚合物胶束。4. FA-PEG-g-PAsp-CDDP和CDDP的体内抑瘤效果无显著性差异(P>0.05),但均高于mPEG-g-PAsp-CDDP组和空白对照组(P<0.05),且FA-PEG-g-PAsp-CDDP的抑瘤效果有高于CDDP的趋势；同步放化疗实验中FA-PEG-g-PAsp-CDDP的抑瘤效果优于CDDP (P<01.05),并且二者均优于mPEG-g-PAsp-CDDP组和单独放疗组(P<0.05)。在单独用药实验和同步放化疗实验中,裸鼠CDDP给药后体重下降明显,最多下降约10%,而FA-PEG-g-PAsp-CDDP和PEG-g-PAsp-CDDP组裸鼠体重无明显下降。5. CDDP组小鼠半数致死剂量给药7天后死亡6只,而FA-PEG-g-PAsp-CDD. mPEG-g-PAsp-CDDP组小鼠均存活。结论：1.成功构建含叶酸靶向基团的聚合物顺铂载体,能在水中自组装为核／壳结构的球形胶束,其物理特性符合新型载药系统的要求。2.叶酸基团显著增强了顺铂聚合物胶束载体的肿瘤抑制效果。3, FA-PEG-g-PAsp-CDDP和CDDP单独用药疗效无显著差异,在体内均能有效抑制肿瘤生长。4.FA-PEG-g-PAsp-CDDP作为放疗增敏剂效果优于CDDP。5. FA-PEG-g-PAsp-CDDP在不降低CDDP疗效的基础上,减轻了CDDP的近期毒副作用。