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研究背景:原发性肝癌(简称肝癌)是临床上常见的恶性肿瘤之一,其发病率逐年上升,据报道,全球每年新增50多万肝癌患者,其中约有一半在我国,病死率居我国恶性肿瘤的第二位。目前肝癌治疗方法有限,肝脏部分切除及肝移植是潜在的最佳选择,但仅仅只有10%-20%的患者有条件进行治疗;对不能手术切除的中晚期肝癌患者,微创治疗虽能一定程度控制局部肿瘤病灶生长,缓解局部症状但无法根治肿瘤,大多数肝癌患者最终死于肿瘤的侵袭和转移,因此,迫切需要寻求一种安全、更有效、低毒的治疗方法。近期研究发现MTDH/AEG-1具有癌基因的功能,能促进肿瘤细胞增殖、侵袭转移,增加肿瘤耐药性,在许多恶性肿瘤中参与肿瘤进展的各主要过程。相比良性肝肿瘤及正常肝组织细胞,MTDH/AEG-1在肝癌组织和培养的肝癌细胞中表达明显升高。本课题拟在建立采用Hep G2肝癌细胞系,通过小干扰RNA技术(small interfering RNA,si RNA)下调MTDH的表达,观察其对肝癌细胞增殖、迁移、凋亡等生物学行为的影响,通过以上研究来验证以MTDH/AEG-1作为靶点是否能有效预防和抑制肝癌生长、转移。目的:探讨研究干扰下调MTDH基因表达对肝癌Hep G2细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法:采用si RNA技术,下调肝癌Hep G2细胞MTDH基因的表达,免疫细胞化学及Western bolt实验检测干扰效果。MTT实验检测MTDH基因下调对Hep G2细胞增殖的影响,TUNEL细胞凋亡实验检测细胞凋亡情况,流式细胞术(FCM)检测细胞周期,划痕实验观察细胞迁移能力,RT-PCR检测Bcl-2、Bax m RNA表达验证促进细胞凋亡情况。结果:通过MTDH-si RNA干扰下调MTDH基因表达后,肝癌Hep G2细胞增殖能力明显下降,作用48小时和96小时的增殖抑制率分别达到43.8%和64.6%;细胞明显阻滞于静止期(G0)或DNA合成前期(G1),细胞凋亡速比例增加,凋亡率增加23.46%,细胞迁移能力显著降低,Bax基因表达明显上调,而Bcl-2表达下调,促进细胞凋亡。结论:MTDH-si RNA干扰下调MTDH基因表达可抑制Hep G2细胞增殖,阻滞其于G0/G1期,并诱导细胞凋亡,可明显抑制肝癌Hep G2细胞的迁移能力。MTDH基因有望成为肝癌治疗的新靶点。