【摘 要】
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[目的]肿瘤干细胞的概念已被普遍接受。前期的报道肿瘤干细胞广泛存在于实体肿瘤中,在肿瘤的增殖、肿瘤的进展过程中发挥重要功能。同时,基于肿瘤干细胞的进一步研究发现,它
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[目的]肿瘤干细胞的概念已被普遍接受。前期的报道肿瘤干细胞广泛存在于实体肿瘤中,在肿瘤的增殖、肿瘤的进展过程中发挥重要功能。同时,基于肿瘤干细胞的进一步研究发现,它在的肿瘤治疗过程中,发挥治疗抵抗机制的作用。因此,肿瘤干细胞已经成为攻克肿瘤的较有希望的潜在靶点。我们通过研究潜在的肿瘤干细胞标志物CD90,探索CD90基因在食管鳞癌肿瘤细胞接受辐射后,对肿瘤细胞的功能及生物学行为的影响及其作用机制,为食管癌的综合治疗提供新的理论基础。[材料与方法]我们使用了常见的ECA109、TE13食管鳞癌细胞株,通过慢病毒转染的方法,成功构建了稳定CD90基因过表达食管鳞癌细胞模型,并采用常规的实验方法验证了转染的效率。我们观察CD90过表达肿瘤细胞在接受特定剂量的辐射后,与对照组相比其毒性增殖能力、克隆能力、凋亡、侵袭与迁移能力,以及裸鼠体内成瘤能力的差异。通过Western Blot的方法评估了上皮间质化(EMT)的相关经典蛋白E-cadherin、Vimentin等的表达水平。[结果]我们发现在食管鳞癌细胞中,CD90阳性表达的肿瘤细胞的比例较少,且随着辐射剂量的增加,存活的肿瘤细胞中其比例不断上升。此外,CD90基因过表达的肿瘤细胞表现出一些干细胞样特征,包括致肿瘤发生能力的提升与迁移能力的增加。而这些细胞生物学的改变在接受辐射后存活的肿瘤细胞中,均再次得到不同程度的强化。进一步研究揭示了,CD90基因在辐射介导的肿瘤细胞的上皮间质化过程中发挥作用,通过蛋白印迹技术(WB)检测,ETS-1基因与其下游的金属蛋白酶(MMPs)表达水平明显增加,提示CD90基因与辐射介导的与肿瘤细胞上皮间质化相关。[结论]我们的实验揭示了 CD90基因过表达食管鳞癌细胞能够显示出某些肿瘤干细胞样特性,在经过特定的辐射剂量后呈现出一定的辐射抗性,具体表现在在存活细胞的增殖、迁移、抗凋亡能力的提升。从临床角度而言,伴有CD90基因高表达的食管鳞癌患者,可能存在对肿瘤凋亡的抑制以及迁移与侵袭能力的提高,预示着较高的局部侵润与远处转移能力,可能提示不良预后。针对CD90基因对辐射介导的食管鳞癌细胞的作用机制的研究,将为食管鳞癌患者的综合治疗提供新思路。
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