研究目的 乳腺癌是全世界女性中最常见的癌症,早期发现和干预可能是降低其发病率和死亡率的最有效手段。癌症相关驱动基因已成为早期乳腺癌的一个重要研究领域。我们旨在探索出现于乳腺癌早期作为驱动基因的lncRNA,研究CARMN在乳腺癌中发挥的生物学功能,并探究CARMN通过肿瘤上皮间质转变介导乳腺癌进展的分子机制,为乳腺癌的早期发现及干预提供新见解。研究方法 利用TCGA和GEO数据库的样本数据分析可能作为早期乳腺癌驱动基因的lncRNA,选择显著差异表达的lncRNA CARMN进行预后分析。选择CARMN低表达的乳腺癌细胞系构建稳定过表达CARMN的细胞系,使用CCK-8实验、克隆形成实验、transwell实验、划痕实验以及化疗药物的敏感性试验观察CARMN在乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭、化疗药物敏感性方面的作用。通过GEO的样本数据寻找CARMN的潜在下游靶基因和相关功能通路,并在m RNA和蛋白水平检测CARMN对MMP2乳腺癌EMT表型的调控。在CARMN稳转株中转染过表达质粒pc DNA-MMP2进行回复实验,观察乳腺癌细胞转移能力的改变,并检测EMT相关蛋白表达水平。在体内实验中,通过尾静脉注射乳腺癌细胞构建裸鼠转移模型,观察CARMN对乳腺癌转移的影响。为了进一步探究CARMN调控MMP2的分子机制,使用RNA pull-down联合结合质谱技术,确认CARMN直接结合蛋白分子DHX9,并通过RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）实验验证其结合。为了确认DHX9与MMP2之间的调控关系,我们在乳腺癌细胞系中敲低DHX9,并检验MMP2的表达水平。使用染色质免疫共沉淀（Ch IP）实验验证DHX9与MMP2启动子区域的结合,并检测过表达CARMN对DHX9与MMP2启动子区域结合的影响。研究结果 lncRNA CARMN在乳腺癌样本和细胞系中表达明显下调,且乳腺癌组织中CARMN表达水平较高的患者与更好的预后相关。在体外实验中,过表达CARMN抑制细胞增殖、迁移,并增强乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性。进一步研究发现,CARMN通过下调MMP2 m RNA和蛋白水平,抑制乳腺癌上皮间质转化和转移。体内实验结果表明,过表达CARMN抑制了乳腺癌的转移。此外,我们还证明DHX9结合于MMP2启动子区域并转录激活MMP2的表达,CARMN通过阻断DHX9与MMP2启动子区域的结合导致MMP2转录抑制。研究结论 在乳腺癌中,长链非编码RNA CARMN可作为抑癌基因抑制肿瘤的增殖和迁移,并增强乳腺癌细胞对多柔比星的敏感性。CARMN通过与DHX9结合,阻断DHX9与MMP2启动子区域的结合,从而抑制MMP2的转录并抑制肿瘤上皮间质转变,在乳腺癌转移中发挥重要作用。此外,CARMN的下调是乳腺癌进展过程中的早期事件,可作为早期乳腺肿瘤进展和转移的生物标志物。