骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血再灌注神经功能及形态学影响的初步研究

来源 :中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mosalin
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背景:脑血管疾病(cerebrovasculardisease,CVD)是人类疾病的三大死亡原因之一。急性起病,迅速出现局限性或弥漫性脑功能缺失征象的脑血管性临床事件称“卒中”(Stroke),其中60-70%为缺血性卒中,即脑梗死(cerebralinfarction,CI)。其关键在于挽救缺血半暗带中仍存活的神经元。但当前临床常规治疗效果不理想。最近的研究表明,细胞移植治疗神经系统疾病是一种有前景的治疗方式。迄今已经有多种类型的干细胞应用于脑缺血的实验研究,其中,骨髓间质细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)较神经干细胞和胚胎干细胞(ES)更有优势。例如,BMSCs易于获取、分离、纯化、培养,并具有较强的分化潜能,体内或体外实验提示可向多种组织分化。研究表明BMSCs移植可以改善动物脑缺血神经功能损伤的程度。此外,亦有研究证实BMSCs可以穿越血脑屏障、并在脑组织中迁移,分化为胶质细胞和神经元。现在,有诸多实验室正在致力于BMSCs移植治疗脑缺血的研究,但仍停留在行为改善的水平,而缺乏生理功能的改善的证据,例如几乎没有研究发现分化后的神经细胞突触发生;亦有观点认为,其更重要的作用在于与生物活性物质的交互作用。本研究拟以BMSCs脑皮层立体定向注射的方式,观察其对脑缺血的治疗作用和可能的机制。 方法:制作大鼠脑缺血再灌注模型(middlecerebralarteryocclusion,MCAO),立体定向脑实质注射骨髓间充质干细胞。并进行以下方面的研究:1.人源细胞移植组及对照组行如下测试(1)行为学测试,包括神经学严重性评分(NeurologicalSeverityScores,NSS)、转棒实验、Morris水迷宫、粘贴试验。 (2)免疫组化分析血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)。 2.鼠源细胞移植组及对照行如下测试(1)脑梗死体积比例分析。 (2)对血脑屏障(brainbloodbarrier,BBB)恢复程度的影响。 结果:1.人源细胞移植组及对照组:(1)行为学测试,转棒试验治疗组显著优于对照,NSS评分及迷宫速度无显著差异,余项于约第15-25天间的观察点观察到治疗后改善。 (2)免疫组化:移植组较对照组观察到强阳性VEGF表达细胞;微血管密度差别试分析,t检验,p=0.055。 2.鼠源细胞移植组及对照组:(1)脑梗死体积比例统计,组间t检验,p=0.545。 (2)血脑屏障,左脑移植、对照组间比较,移植组平均染料含量低于对照,p<0.05;右脑移植、对照组间比较,p=0.683。 结论:(1)行为学改善,治疗作用主要体现在术后约第15-25天。 (2)免疫组化提示移植可能对VEGF表达、微血管密度有促进作用。 (3)BMSCs移植对脑梗死体积无显著影响。 (4)BMSCs移植对MCAO后血脑屏障的恢复无显著影响。
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