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目的：1.探讨妊娠期糖尿病（GDM）患者脂肪细胞因子瘦素、视黄醇结合蛋白4（RBP4）、脂联素与炎症细胞因子IL-6、TNF-α的关系。2.制备人视黄醇结合蛋白4（RBP4）分子RNAi载体及真核表达载体。3.检测其干涉人肝细胞系LO2中RBP4的表达后对ERK1/2表达及磷酸化和葡萄糖摄取的影响。方法：1.选择GDM孕妇60例，正常糖耐量孕妇（NGT）44例，采用酶联免疫吸附法检测两组孕妇血清中脂联素和RBP4水平，放射免疫法检测两组孕妇空腹胰岛素（FIns）、瘦素、IL-6、TNF-α的水平，葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖（FBG）水平，计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和胰岛素敏感指数（ISI），酶法检测血清TG、TC，比色法测定游离脂肪酸（FFA）水平，计算晚孕期体重指数（BMI），并进行Pearson相关分析。2.分别构建针对RBP4基因表达框5′端和3′端的干涉载体pSilencerTM4.1-RBP4-5′，pSilencerTM4.1-RBP4-3′及pSecTag-RBP4真核表达载体，经测序和酶切鉴定后将干涉载体转染人LO2细胞株，RT-PCR和Western blot法确定其干涉RBP4表达的效率，选择干涉较高的载体用于后续实验。3.将LO2细胞分为未转染的空白对照组、阴性对照组、转染pSecTag-RBP4质粒的RBP4高表达组和转染pSilencerTM4.1-RBP4的RBP4低表达组，Western blot检测ERK1/2的表达及磷酸化水平的改变，葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖的残留量。结果：1.与NGT组孕妇比较，GDM组孕妇的空腹血糖、血脂、FFA、瘦素、IL-6、TNF-α、RBP4均明显升高，脂联素水平明显下降，存在显著的炎性激活及胰岛素抵抗；HOMA-IR、RBP4、瘦素与IL-6、TNF-α正相关，ISI、脂联素与IL-6、TNF-α负相关。2.构建的真核表达载体和干涉载体经酶切、测序鉴定结果正确，并有明显的高表达或干涉效果，选择pSilencerTM4.1-RBP4-5′进行干涉实验。3.经Western blot分析，与空白对照组相比，各组蛋白ERK1/2的表达量均无明显变化； pSecTag-RBP4高表达组的ERK1/2的磷酸化显著下降，pSilencerTM4.1-RBP4-5′干涉组的ERK1/2的磷酸化显著上升。胰岛素刺激后pSecTag-RBP4高表达组的葡萄糖摄取明显下降，pSilencerTM4.1-RBP4-5′组的葡萄糖摄取明显增加。结论：1. GDM患者的炎性激活与过度分泌的脂肪细胞因子之间存在明显的正相关，可能是GDM中胰岛素抵抗发生发展的机制之一。2.成功制备RBP4基因的干涉载体和应用于LO2细胞中ERK1/2的研究，为后续RBP4对MAPK信号通路的进一步研究奠定基础。