论文部分内容阅读
目的：采用卵清蛋白（VOA）致敏及激发复制小鼠哮喘模型，观察红景天联合糖皮质激素对哮喘小鼠肺组织中白介素-4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）、转化生长因子β1（TGF-β1）、一氧化氮（NO）、总抗氧化能力（T-AOC）的表达和气道胶原沉积面积的影响，探讨红景天联合糖皮质激素对哮喘小鼠气道炎症、气道重塑和氧化应激的调控作用及机制。方法：56只C57bL/6小鼠随机分成对照组（A组）、哮喘组（B组）、布地奈德组（C组）、红景天低剂量组（D组）、红景天高剂量组（E组）、低剂量红景天联合布地奈德组（F组）、高剂量红景天联合布地奈德组（G组），每组8只。采用VOA致敏及激发复制哮喘模型，雾化吸入布地奈德和低、高剂量红景天灌胃干预。观察小鼠临床表现特点，刘氏染色法分类计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞数，双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测BALF中IL-4、IFN-γ和TGF-β1的浓度，HE染色和masson染色观察气道炎症及气道胶原沉积面积，免疫组化法检测肺组织中TGF-β1、IL-4和IFN-γ的表达，总NO检测试剂盒检测肺组织中NO活性，T-AOC检测试剂盒（ABTS）检测肺组织中T-AOC含量。结果：1. BALF细胞总数及其分类计数的结果：B组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数较A组明显升高（P<0.05）；C组、D组、E组、F组和G组BALF中细胞总数及嗜酸性粒细胞计数较B组明显下降，且高剂量组与低剂量组相比较降低明显，差异具有统计学意义（P均<0.05），G组细胞总数及嗜酸性粒细胞计数降低最为显著。2. BALF中IL-4、TGF-β1、IFN-γ结果：B组IL-4、TGF-β1（259.16±4.27，160.49±6.41）的水平较A组（27.46±5.82，59.32±7.39）明显增高（P<0.05），而B组IFN-γ的水平（72.53±9.43）较A组（187.94±10.54）显著降低（P<0.05）；经红景天及布地奈德干预后，BALF中IL-4、TGF-β1在C组（84.14±5.21，97.86±5.37）、D组（147.53±3.59，113.13±6.28）、E组（135.36±3.34，104.27±5.14）、F组（78.38±6.04，91.32±7.03）和G组（73.14±2.93，85.24±7.08）中的水平较B组明显降低，G组降低最明显，差异具有统计学意义（P均<0.05），而IFN-γ在C组（122.58±12.61）、D组（92.7±11.39）、E组（103.4±9.72）、F组（126.37±10.39）和G组（130.29±8.22）中的水平较B组则明显升高，G组升高最明显，差异具有统计学意义（P均<0.05）。3.（1）HE染色：B组可见大量炎症细胞浸润，A组无明显炎症改变，经红景天及布地奈德干预后，C组、D组、E组、F组和G组炎症细胞浸润明显减少，以G组减少最明显；（2）Masson染色：B组可见大量胶原沉积，Wcol／Pbm（32.8±5.1）较A组（5.4±1.3）明显增高（P<0.05），经红景天及布地奈德干预后，C组（10.7±2.5）、D组（11.9±2.6）、E组（11.0±2.4）、F组（9.9±3.2）和G组（8.7±1.9）中Wcol／Pbm较B组明显降低，以G组减轻最为明显，差异具有统计学意义（P均<0.05）。4.支气管肺组织免疫组化IL-4、TGF-β1、IFN-γ的表达： B组IL-4、TGF-β1（0.335±0.017，0.417±0.008）的水平较A组（0.039±0.006，0.168±0.003）明显增高（P<0.05），而B组IFN-γ的水平（0.093±0.009）较A组（0.314±0.027）显著降低（P<0.05）；经红景天及布地奈德干预后，BALF中IL-4、TGF-β1在C组（0.130±0.003，0.238±0.004）、D组（0.156±0.009，0.298±0.017）、E组（0.143±0.005，0.271±0.013）、F组（0.126±0.013，0.227±0.015）和G组（0.114±0.002，0.213±0.009）中的水平较B组明显降低（P均<0.05），而IFN-γ在C组（0.276±0.005）、D组（0.238±0.012）、E组（0.249±0.004）、F组（0.282±0.014）和G组（0.288±0.003）的水平较B组明显升高,差异具有统计学意义（P均<0.05）。5.肺组织中NO和T-AOC的含量：与A组（0.328±0.124，1.030±0.021）相比，B组（1.235±0.084，0.475±0.023）肺组织中NO的含量显著升高，T-AOC的含量明显降低（P<0.05）；经干预后与B组相比，C组（0.764±0.007，0.750±0.106）、D组（0.892±0.156，0.502±0.202）、E组（0.813±0.005，0.580±0.219）、F组（0.715±0.016，0.780±0.061）和G组（0.669±0.172，0.803±0.110）肺组织中NO的表达明显降低，T-AOC明显升高，差异具有统计学意义（P均<0.05）。结论：1.OVA致敏及激发可成功构建小鼠哮喘模型。2.红景天和布地奈德干预治疗均可抑制哮喘小鼠肺组织中IL-4、TGF-β1、NO的水平并增加IFN-γ、T-AOC的表达，但以布地奈德作用更明显。3.红景天能够抑制气道炎症和气道重塑，具有抗氧化作用，且存在剂量依赖关系。4.红景天和布地奈德联合用药具有协同作用，其机制可能是通过调节IL-4/IFN-γ、NO/T-AOC失衡，抑制TGF-β1的表达有关。