氯胺酮对脓毒症大鼠炎症因子表达及肺损伤的影响

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目的:研究氯胺酮干预对盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠早、晚期炎症因子表达与肺损伤的影响,探讨氯胺酮的抗炎作用、肺保护作用及其可能机制。 方法:75只SPF级雄性成年Wistar大鼠随机分为三组:(1)假手术组(Sham组);(2)盲肠结扎穿孔(Cecal ligation and puncture,CLP)组(CLP组);(3)氯胺酮干预组(KET组)。CLP组和KET组施行盲肠结扎穿孔术,Sham组除不作环形结扎和针刺穿孔外其余操作均与CLP组相同。术毕半小时后,KET组大鼠给予5%氯胺酮50mg/kg(im,bid),其余两组予等容积生理盐水。在术后6h、24h、72h各随机处死大鼠5只,分别作为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚组,取大鼠肺组织、动脉血及血清待测。每组剩余的10只作为Ⅳ亚组,以观察5天生存率。测定各组大鼠不同时间点动脉血氧分压(PaO2);肺组织湿/干重比(W/D);中性粒细胞计数;脓毒症严重程度评分;ELISA法测血清TNF-α、IL-6、IL-10;IHC法和RT-PCR法分别检测肺组织HMGB1蛋白和HMGB1mRNA。IHC法检测肺组织NF-κB蛋白。 结果:CLP组大鼠脓毒症严重程度评分、W/D、中性粒细胞计数随着时间点的延长而增高,PaO2随着时间点的延长而下降,与Sham组同时间点比较,具有显著性差异(P<0.05);KET组上述指标均显著优于于CLP组同时间点(P<0.05),半数生存时间高于CLP组(P<0.05)。 CLP组大鼠术后TNF-α、IL-6在6h表达至顶峰,随后下降,但各时间点仍显著高于Sham组(P<0.05);KET组TNF-α在6h,IL-6在6h和24h时间点显著低于CLP组同时间点(P<0.05)。CLP和KET组IL-10水平在各时间点显著高于Sham组同时间点(P<0.05),且KET组6h时间点显著高于CLP组,24h显著低于CLP组(P<0.05)。KET组TNF-α/IL-10比值在6h显著低于CLP组,而在24h时间点高于CLP组(P<0.05)。 肺组织HMGB1及HMGB1mRNA在CLP术后6h即有表达,24h达高峰,72h还保持较高水平,NF-κB在CLP术后6h达高峰,且各时间点都明显高于Sham组(P<0.05),而KET组较CLP组同时间点比较都有明显降低(P<0.05)。 结论:氯胺酮能抑制脓毒症大鼠早、晚期炎症因子表达,对肺损伤具有保护作用,提高生存率,其机制可能与抑制NF-κB活化以及早期协调炎症平衡有关。
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