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目的:研究真核延伸因子激酶2(eEF-2K)对黑色素瘤细胞存活和增殖能力的影响及靶向eEF-2K对Vemurafenib治疗敏感性的研究。方法:采用分子生物学、细胞生物学和药理学等多种方法检测1)eEF-2K对黑色素瘤细胞存活、增殖能力的影响;2)靶向eEF-2K对黑色素瘤细胞Vemurafenib治疗敏感性的作用及机制研究;3)eEF-2K抑制剂NH125与Vemurafenib协同治疗研究。结果:本研究发现:1)eEF-2K在BRAF V600E突变的黑色素瘤细胞呈高表达。MTT和克隆集落实验表明:eEF-2K可促进黑色素瘤细胞存活、增殖,沉默eEF-2K或NH125处理(eEF-2K的特异性抑制剂)后,黑色素瘤细胞存活和增殖能力明显下降;2)靶向eEF-2K可促进黑色素瘤细胞对Vemurafenib治疗敏感性。用Vemurafenibe分别治疗黑色素瘤Vemurafenibe敏感株和耐药株细胞,蛋白印迹实验表明,Vemurafenib可以明显下调敏感株细胞eEF-2K的活性,而耐药株细胞却没有明显变化;沉默eEF-2K或用NH125处理后,Vemurafenib可明显抑制黑色素瘤细胞存活和增殖,并可促进凋亡蛋白cleaved PARP表达明显增加;COMPUSYN软件分析NH125与Vemurafenib联合使用具有协同作用,协同指数CI<1;3)NH125与Vemurafenib协同诱导黑色素瘤细胞凋亡主要通过调控抗凋亡蛋白survivin的表达而实现,表现为两者合用后,survivin表达明显下调,过表达survivin后,凋亡水平得到部分抑制。结论:靶向eEF-2K可促进黑色素瘤细胞对Vemurafenib治疗敏感性,NH125与Vemurafenib具有协同作用,具体机制主要是通过调控抗凋亡蛋白survivin的表达而实现的。我们的研究结果表明,eEF-2K可以作为一个新的潜在的治疗黑色素瘤的靶点,同时这两种药物的组合使用有可能被用作新的逆转黑色素瘤BRAF抑制剂治疗耐药的新策略。