【摘 要】
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背景:胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤,其病程的早期即容易发生远处转移,对放疗、化疗均不敏感,其5年生存率小于5%[1]。已有研究发现,在胰腺癌肿瘤细胞发生EMT(上皮间质转化)
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背景:胰腺癌是一种恶性程度很高的肿瘤,其病程的早期即容易发生远处转移,对放疗、化疗均不敏感,其5年生存率小于5%[1]。已有研究发现,在胰腺癌肿瘤细胞发生EMT(上皮间质转化)的过程中,E-钙黏蛋白表达下降,波形蛋白表达上升,从而使胰腺癌发生远处转移,并导致较差的预后[2,3]。目前对胰腺癌中EMT的上游调节机制的研究尚不充分,寻找EMT抑制性调节因子尤为重要。miRNA能够在转录水平调节mRNA的表达,是近年来的研究热点,胰腺癌中能够抑制EMT的miRNAs可能成为诊断标志物及治疗靶点。目的:以胰腺癌细胞株SW1990为研究对象,检测miR-181b/ZEB2反馈通路对胰腺癌细胞株SW1990中EMT过程的影响。方法:1.MTT和流式细胞技术检测miR-181b对SW1990细胞株增殖及凋亡的影响。2.qRT-PCR和Western blotting检测miR-181b对SW1990细胞株ZEB2、Virnentin和E-cadherln表达的影响。2.ChIP-PCR检测SW1990中ZEB2与miR-181b启动子之间是否有直接结合的关系。3.双荧光素酶报告基因实验检测ZEB2对miR-181b表达的影响。结果:1.miR-181b促进SW1990细胞株凋亡,抑制其增殖。2.miR-181b-mimic转染细胞后,E-cadherln的表达水平显著升高,ZEB2表达水平显著降低。2.胰腺癌细胞株SW1990中ZEB2与miR-181b启动子是相结合。3.双荧光素酶报告基因实验证实ZEB2劫持或抑制miR-181b真正的转录因子。结论:miR-181b/ZEB2负反馈通路通过调控EMT影响胰腺癌细胞的增殖及凋亡。
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