表面等离子共振成像检测白血病融合基因新方法研究

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表面等离子共振是一种发生在金属薄膜和电介质分界面上的物理现象,其对金属表面电介质折射率变化可以用于实时检测发生在金属薄层表面与介质层折射率变化相关的物理量变化,以及化学生物的反应和转化过程。表面等离子共振成像是一种是集SPR技术、CCD成像与阵列化芯片于一体的新型免标记、高通量的光学传感技术,广泛应用于生物分子的相互作用研究。嵌合型BCR/ABL融合基因在慢性粒细胞白血病(CML)病程的发展中起着重要作用。BCR/ABL融合基因的检测对于慢性粒细胞白血的早期诊断、预后、甚至患者治疗过程中疗效监控起着至关重要的作用。目前的检测方法需要专门的仪器设备和专业的技术人员进行分析操作。因此,发展一种快速简单的筛选方法对BCR/ABL白血病融合基因进行直接检测对于临床诊断具有至关重要的意义。在本项研究中,我们开发了一个自制的强度调制型表面等离子体共振成像(SPRi)系统,用以直接检测慢性骨髓性白血病(CML)的特异性序列BCR/ABL融合基因。本课题主要探讨了便面等离子共振成像平台的构建和构建之出现的问题,并建立了基于此平台的核酸分析策略,为临床诊断提供了有力的工具。表面等离子共振成像平台检测到的反射光强度与金岛阵列化的传感器芯片表面修饰DNA捕获探针与目标ssDNA的选择性杂交引起的折射率变化成正比。用不同浓度的合成靶DNA序列在该平台上进行测试。目标序列的拟合曲线显示目标物浓度与反射光强度变化之间具有的良好的线性关系。该SPRi检测平台的检测限可以达到10.29nM。通过比较SPRi图像,可以有效区分目标ss DNA和非互补DNA序列。该SPRi系统已被成功应用于从实际样品中提取的BCR/ABL融合基因检测。因此,该SPRi平台为生物医学研究和分子诊断中的DNA检测提供了一种高效,高通量无标记的替代工具。
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