目的建立小鼠大脑脑片炎症模型,研究褪黑素(Melatonin,MEL)通过其受体对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的中枢神经炎症的保护作用及机制,为进一步探索褪黑素对中枢炎症及相关脑内疾病的作用机制提供理论基础。方法取出生后10天小鼠,制备小鼠大脑切片,实验分为四组:CTRL组、LPS组(LPS处理24h)、LPS+MEL组(MEL预处理6h后给予LPS处理24h)、MEL组(MEL处理6h)。应用酶联免疫吸附分析方法检测大脑切片中炎症因子IL-6的含量,应用蛋白印记方法检测大脑切片中标记小胶质细胞特异蛋白CD11b及褪黑素受体MT1、MT2的表达水平。为进一步研究验证本实验,将褪黑素受体MT1、MT2的拮抗剂2-苯基-N-乙酰色胺(Luzindole,LUZ)加入到经LPS和MEL共同处理的大脑脑片培养基中,实验进一步分组为:CTRL组、LPS组(LPS处理24h)、LPS+MEL组(MEL预处理6h后给予LPS处理24h)、MEL组(MEL处理6h)、LPS+MEL+LUZ组(MEL与LUZ共同预处理6h后给予LPS处理24h)。再应用酶联免疫吸附分析方法检测大脑切片中炎症因子IL-1β和IL-10的含量,应用蛋白印记方法检测大脑切片MT1、MT2的表达水平。结果1、应用LPS诱导体外培养的脑片制造小鼠大脑炎症模型,24h后炎症因子释放和CD11b的蛋白表达水平升高,给予褪黑素预处理后炎症因子IL-6释放和CD11b的蛋白表达水平均下降,同时,LPS还降低褪黑素受体MT1和MT2的蛋白表达水平。2、加入褪黑素受体MT1和MT2的拮抗剂LUZ后,MT1的蛋白表达水平明显降低,较CTRL组和LPS+MEL组炎症因子IL-1β和IL-10释放水平升高,进一步证明了褪黑素通过褪黑素受体MT1减轻LPS导致的神经炎症反应。结论1、应用LPS诱导体外培养的脑片成功制造器官型小鼠大脑炎症。2、褪黑素能够减轻LPS诱导的神经炎症反应。3、褪黑素可能通过褪黑素受体MT1对LPS介导的神经炎症反应发挥保护作用。