癌症作为世界三大疾病之一,其高致病性与高致死率成为当今医学研究的重点。目前研究表明,在癌细胞中均发现DNA损伤加剧的情况。细胞内为了应对损伤,存在着很多DNA损伤修复系统,因此对于DNA损伤修复系统的研究显得尤为重要。碱基切除修复途径(Base Excision Repair—BER)是一种广泛存在于细胞中的损伤修复途径,DNA聚合酶β(Pol β)是BER损伤修复途径中的关键限速酶,在BER过程中Pol β的主要作用是在无嘌呤嘧啶位点(AP位点)加入碱基。但Pol β的功能不止如此,在许多生命活动中,Pol β都发挥着重要的作用,如参与周期调控和损伤耐受等。MicroRNA(miRNA)是一组长度为18-25nt左右的小分子非编码RNA,可以通过调节下游靶基因来调控相关生物学过程。基于一种miRNA可以调控多种下游靶基因这一特性,赋予了 miRNA功能的多样性。由于miRNA的小分子特性,经常被用作肿瘤治疗药物,靶向治疗相关肿瘤。本文中为了研究Pol β蛋白的功能,我们在小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblast cells,MEF)细胞中构建了 Pol β敲除细胞系,在培养正常与Pol β敲除细胞系的过程中发现当Pol β缺失时,细胞的生长速率降低。针对这一现象,我们对两种细胞的凋亡和增殖情况进行检测,发现当Pol β缺失后细胞周期S期出现明显阻滞,通过对细胞周期各时期周期蛋白及其相关激酶(cyclin/CDK)的检测确定细胞主要被阻滞于S期,而Pol β可能是通过作用cyclin A/CDK2发挥作用。许多关于miRNA的报道均显示miRNA可以参与到周期调控中,那Pol β对于周期的调控miRNA是否也参与其中,为此我们将两种细胞中miRNA的表达进行分析,结果表明Pol β蛋白的缺失会影响miRNA的表达。其中miR-10b和miR-181b由于在Polβ敲除细胞中下调比例高,而且与细胞周期密切相关,因此我们选取这两种miRNA来进行研究。最终我们发现Polβ可以通过调节miR-1 0b和miR-181 b来调控cyclin A/CDK2的表达从而影响细胞周期进程。为了确定这一调控线路是否在癌细胞中适用,我们使用乳腺癌细胞MCF-7构建MCF-7 Pol β敲降细胞系并做了与MEF细胞中相同的检测,发现该调控路线也适用于肿瘤细胞中。癌症是在现代社会中是一种高发且致死率很高的一种疾病,临床上并没有一种可以完全治愈癌症的药物,因此有效治愈肿瘤药物的研发是目前的研究热点。本文中,当敲除Pol β后细胞周期会停滞,而miR-10b和miR-181b的表达会解除周期阻滞,由此提示我们在癌细胞中抑制miR-1 0b和miR-181b的表达,可以降低细胞增殖速率,针对癌细胞能无限快速增殖的特性来治疗癌症。