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目的:肺癌是癌症中最常见的一种恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC）约占肺癌的75%-80%比例。且目前研究认为KRAS基因突变是非小细胞肺癌患者不良预后的因素。药物代谢酶广泛地分布在各组织器官中,对物质的吸收、分布、代谢以及排泄都起着非常重要的作用。药物代谢酶不仅在不同性别和各器官中的表达存在差异,还会随着年龄变化发生改变。目前,很少有研究报道过KRAS基因突变后体内药物代谢酶的变化情况,而人的药物代谢酶基因与小鼠具有同源性,且KRAS突变型肺癌小鼠与人的非小细胞型肺癌类似,因此本研究旨在阐明KRAS突变型肺癌小鼠中药物代谢酶变化情况,期望能为临床合理用药及抑制剂药物的研发提供一定依据。方法:本实验对在不同性别及不同周龄（5周龄、10周龄、15周龄、20周龄和26周龄）的KRAS突变型肺癌小鼠和野生型小鼠的肝脏、肠道及肾脏组织中,8个Cyps亚型（Cyp1b1、Cyp2c29、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11、Cyp3a25、Cyp7a1和Cyp27a1）、10个Ugts亚型（Ugt1a1、Ugt1a2、Ugt1a5、Ugt1a6a、Ugt1a9、Ugt2a3、Ugt2b1、Ugt2b5、Ugt2b34和Ugt2b36）和3个Sults亚型（Sult1a1、Sult1b1和Sult1d1）的蛋白表达含量进行研究,并对其中差异较大的个别亚型进行活性检测。采用实验室已经建立好的LC-MS/MS定量特异性探针多肽的方法对样本中各亚型蛋白含量进行定量,并采用特异性底物探针法进行活性检测。本研究的数据采用SPSS 19.0统计学软件进行统计分析,统计方法选用单因素方差ANOVA分析及Kruskal-Wallis H分析,再利用Pearson product-moment对正态分布数据进行相关性分析,利用Spearman’s rank correlation对非正态数据进行相关性分析,当p<0.05表示有统计学意义。结果:1:药物代谢酶广泛分布于KRAS突变型肺癌小鼠和野生型小鼠的肝脏、肠道及肾脏组织中。肝脏中药物代谢酶含量最高,所检测到的药物代谢酶有Cyp1b1、Cyp2c29、Cyp2d22、Cyp2e1、Cyp3a11、Cyp3a25、Cyp7a1、Cyp27a1、Ugt1a1、Ugt1a5、Ugt1a6a、Ugt1a9、Ugt2a3、Ugt2b1、Ugt2b5、Ugt2b34、Ugt2b36、Sult1a1和Sult1d1,其中Ugt2b5、Ugt2b1、Ugt1a6a、Cyp2c29、Cyp2d22及Sult1a1含量最高。肠道中所检测到的药物代谢酶有Cyp1b1、Cyp2d22、Cyp3a11、Cyp3a25、Cyp7a1、Ugt1a1、Ugt2a3、Ugt2b34、Sult1a1、Sult1b1和Sult1d1,其中Cyp1b1、Ugt2b34、Sult1b1、Cyp2d22和Cyp3a11含量最高。肾脏中所检测到的药物代谢酶有Cyp1b1、Cyp2e1、Cyp7a1、Ugt1a2和Sult1d1,其中Sult1d1、Cyp1b1、Cyp2e1、Cyp7a1和Ugt1a2含量最高。2:对于药物代谢酶在不同性别中的含量差异,我们的结果显示在KRAS突变型肺癌小鼠中不同性别的差异和野生型小鼠中不同性别的差异一致,因此我们主要以野生型小鼠中的含量来讨论。在肝脏中,Ugt2b1在雄性小鼠中的含量高于雌性小鼠（p<0.05）;在肾脏中,Cyp2e1在雄性小鼠中含量高于雌性（p<0.05）,而Ugt1a2在雌性小鼠中含量高于雄性（p<0.05）。3:对于不同年龄阶段,5周龄后大部分药物代谢酶蛋白变化差异不大。其中Ugt1a9在野生型和KRAS突变型肺癌小鼠肝脏中随周龄增加有下降趋势;Ugt2b34在雄性野生型和雄性KRAS突变型肺癌小鼠肠道中随周龄增加有下降趋势;Sult1a1在野生型和KRAS突变型肺癌小鼠肠道中随周龄增加呈现上升趋势;Cyp1b1在雄性野生型和KRAS突变型肺癌小鼠肾脏中随周龄增加有下降趋势。4:对于KRAS基因突变致使肺癌发生后,各组织脏器中药物代谢酶含量变化,我们的结果显示:对于雄性KRAS突变型肺癌小鼠,在肝脏组织中,5周龄时,Sult1a1上升2.4倍（p<0.05）;15周龄时,Ugt1a1和Cyp27a1分别上升2.3倍和1.9倍（p<0.05）;20周龄时,Sult1a1和Sult1d1分别上升3.4倍和1.8倍（p<0.05）;26周龄时,Sult1a1和Sult1d1分别上升2.0倍和1.8倍,Cyp2c29、Cyp3a11、Cyp27a1、Ugt1a1和Ugt1a5分别下降3.7倍（p<0.05）、4.4倍（p<0.05）、2.1倍（p<0.05）、2.0倍和2.3倍（p<0.05）。在肠道组织中,20周龄时,Sult1b1和Sult1d1分别上升3.2倍和2.9倍（p<0.05）;26周龄时,Sult1a1和Sult1d1分别上升2.0倍和1.8倍。在肾脏组织中,26周龄时,Sult1d1上升3.0倍（p<0.05）。5:Cyp2e1、Ugt1a9、Sult1a1和Sult1b1的活性结果显示:KRAS基因突变致使肺癌发生之后,Cyp2e1和Ugt1a9酶活变化差异不大;而Sult1a1和Sult1d1的酶活在20和26周龄时升高（p<0.05）,且Sult1a1和Sult1d1的酶活在小鼠中的变化趋势相似。6:相关性分析结果显示,药物代谢酶Cyp2e1、Ugt1a9、Sult1a1和Sult1d1的蛋白表达量和活性之间都具有较好的相关性（r2≥0.5,p=0.0001）,表明药物代谢酶蛋白含量的变化可提示可能的酶对药物处置能力的变化。结论:本研究全面阐明了KRAS突变型小鼠与野生型小鼠肝脏、肠道和肾脏中药物代谢酶在5周龄、10周龄、15周龄、20周龄和26周龄的不同性别小鼠中药物代谢酶的变化。可发现KRAS基因突变之后,药物代谢酶的变化大都发生在小鼠20和26周龄（对应人的癌症后期）,其中Cyp2c29、Cyp3a11、Cyp27a1、Ugt1a1和Ugt1a5蛋白表达下降,而Sult1a1和Sult1d1蛋白表达呈现上升趋势。小鼠与人的基因同源性较高,因此临床上在治疗KRAS基因突变导致的肺癌患者时,可结合相应药物代谢酶的变化情况来合理调整药物剂量及药物的配伍,达到最大治疗效果。