【摘 要】
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蜂花粉由蜜蜂收集植物花蕊中的雄性生殖细胞并加入自身腺体分泌物加工而成。荞麦蜂花粉(F.esculentum bee pollen,FBP)是我国产量最高的蜂花粉之一,自古以来被用作保健食品,其化学成分和生物活性得到学者的广泛关注。本论文采用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)技术鉴定荞麦蜂花粉粗提物(F.esculentum bee
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蜂花粉由蜜蜂收集植物花蕊中的雄性生殖细胞并加入自身腺体分泌物加工而成。荞麦蜂花粉(F.esculentum bee pollen,FBP)是我国产量最高的蜂花粉之一,自古以来被用作保健食品,其化学成分和生物活性得到学者的广泛关注。本论文采用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)技术鉴定荞麦蜂花粉粗提物(F.esculentum bee pollen extracts,FBPE)中的有效化学成分,测定其总酚含量(Total Phenolic Contents,TPC)、总黄酮含量(Total Flavonoid Contents,TFC)及体外抗氧化活性,在此基础上,以高脂饮食(High-Fat-Diet,HFD)联合链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)诱导的Ⅱ型糖尿病(Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM)小鼠模型为对象研究FBP的降血糖功能、对肠道菌群的调节作用和对肝组织及血清脂肪酸代谢的影响。全文共分为6章,主要研究结果如下:1、以常温渗漉法提取FBP,通过HPLC鉴定FBPE中的有效活性成分,测定TPC、TFC,并研究了其体外抗氧化活性和对DNA损伤的保护作用。结果表明从FBPE中鉴定到8种酚类化合物,主要成分有木犀草素,白藜芦醇和山奈酚等;FBPE的TPC为18.59±1.39 g GAE/kg、TFC为16.35±0.09 g RE/kg,体外抗氧化活性结果显示DPPH自由基清除力IC50值为11.01 mg/m L,Fe2+络合力为32.84±1.49 mg EDTA-2Na/g,可以有效保护·OH诱导的p BR322质粒DNA氧化损伤。2、以HFD-STZ诱导的T2DM小鼠模型为对象研究FBPE的降血糖功能。动物实验结果显示,FBPE灌胃8周后,T2DM小鼠体内空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG)降低,胰岛素敏感性提高,胰岛素耐量降低,血清和肝脏脂质积累降低,氧化损伤和炎症反应得到缓解,AKT和PI3K mRNA表达上调,肝细胞肥大、肝脂肪堆积和炎症细胞浸润等症状得到缓解,附睾脂肪损伤得到改善。3、采用16s RNA测序法研究了FBPE对HFD-STZ诱导的T2DM小鼠肠道菌群调节作用。发现FBPE的治疗能够降低SMB53属的相对丰度,增加粪球菌属(Coprococcus)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)和图利杆菌属(Turicibacter)的相对丰度,有效调节HFD-STZ引起肠道菌群的变化。4、基于气相色谱-质谱联用(Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)技术研究了FBPE对HFD-STZ诱导的T2DM小鼠肝组织和血清中脂肪酸组成的影响。结果显示,FBPE可以显著提高T2DM小鼠肝脏中C16:0和C18:3n-6相对含量,降低C17:0、C20:0和C20:3n-6相对含量;可以显著提高T2DM小鼠血清中C15:0、C17:1、C18:3n-3、C20:1、C20:3n-6和C20:4n-6相对含量,降低C14:0、C16:0、C18:0和C22:1n-9相对含量,显著提高T2DM小鼠血清单不饱和脂肪酸(Monounsaturated Fatty Acids,MUFAs)和多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated Fatty Acids,PUFAs)相对含量,降低饱和脂肪酸(Saturated Fatty Acids,SFAs)相对含量,提高n-3 PUFAs和n-6 PUFAs相对含量,有效调节HFD-STZ引起的T2DM小鼠血清、肝脏脂肪酸组成的变化。
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