【摘 要】
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肉鸡腹水综合征（Ascites syndrome,AS）是规模化肉鸡养殖场的一种常见疾病,在世界范围内普遍发生,对肉鸡养殖业的健康发展造成较大危害。本研究以新疆阿克苏市郊某肉鸡养殖场的10周龄AS肉鸡为研究对象,调查了该鸡场的AS肉鸡发病情况,并通过HE染色、Masson染色和Van Gieson染色法,对AS肉鸡肺脏、心脏和肝脏进行病理学观察和分析,同时利用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法和
【基金项目】
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国家自然科学基金项目“HIF-1α通过MCP-1调控腹水肉鸡肺动脉高压的机制研究”（项目编号32060785）
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肉鸡腹水综合征（Ascites syndrome,AS）是规模化肉鸡养殖场的一种常见疾病,在世界范围内普遍发生,对肉鸡养殖业的健康发展造成较大危害。本研究以新疆阿克苏市郊某肉鸡养殖场的10周龄AS肉鸡为研究对象,调查了该鸡场的AS肉鸡发病情况,并通过HE染色、Masson染色和Van Gieson染色法,对AS肉鸡肺脏、心脏和肝脏进行病理学观察和分析,同时利用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法和免疫组化法等分子生物学方法,检测AS肉鸡肺脏、心脏和肝脏中的缺氧诱导因子-1ɑ（Hypoxia inducible factor-1ɑ,HIF-1ɑ）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达及分布,分析AS肉鸡肺脏、肝脏和心脏中的HIF-1ɑ与VEGF在其发病过程中的调控作用,以期为本地区AS的防治提供参考资料。通过病理学观察发现,AS肉鸡的肺脏、心脏和肝脏的组织结构均有不同程度的变化。与健康肉鸡相比,AS肉鸡的肺动脉血管有明显重塑的现象,重塑后血管的内膜、中膜和外膜分界不清,内膜可见明显增厚;肝组织完全失去正常结构,肝索排列松散,部分正常肝细胞被炎性细胞和成纤维细胞所代替;心脏组织严重纤维化,心肌纤维呈无规则排列,炎性细胞增多;AS肉鸡肺脏的胶原纤维含量明显增多,而心脏和肝脏的胶原纤维没有显著变化。qRT-PCR结果显示,与健康肉鸡相比,HIF-1ɑ在AS肉鸡肝脏和肺脏中表达差异均极显著（P＜0.01）,但心脏中表达差异不显著（P＞0.05）;VEGF在AS肉鸡肝脏中表达差异显著（P＜0.05）,在肺脏中表达差异极显著（P＜0.01）,而在心脏中表达差异不显著（P＞0.05）。Western-blot结果表明,HIF-1ɑ的蛋白含量在AS肉鸡的肝脏、心脏和肺脏中表达均极显著高于健康肉鸡（P＜0.01）,其中心脏表达量高于肝脏和肺脏;VEGF的蛋白含量与HIF-1ɑ基本一致,在AS肉鸡的肝脏、心脏和肺脏中表达均极显著高于健康肉鸡（P＜0.01）,其中心脏表达量高于肝脏和肺脏。免疫组化结果发现,与健康肉鸡相比,HIF-1ɑ在AS肉鸡的肺脏、心脏和肝脏中表达差异均显著（P＜0.05）,其中肝脏HIF-1ɑ的阳性信号最强;VEGF在AS肉鸡的心脏和肝脏表达差异显著（P＜0.05）,在肺脏中表达差异不显著（P＞0.05）,其中心脏VEGF的阳性信号最强。本试验结果表明,阿克苏市郊某肉鸡养殖场存在AS的发生,且冬季发病率上升明显;该病发生后,AS肉鸡肺脏、心脏和肝脏的组织结构均发生病理变化,且肺动脉周围的胶原纤维分布增多,但肝脏和心脏的胶原纤维无显著变化。与健康肉鸡相比,AS肉鸡肺脏和肝脏中HIF-1ɑ和VEGF的m RNA表达与健康肉鸡存在显著差异,在心脏中表达差异不显著;HIF-1ɑ和VEGF的蛋白在AS肉鸡肺脏、肝脏和心脏中的表达与健康肉鸡差异均显著,而且表达基本趋于一致;HIF-1ɑ在AS肉鸡肺脏、心脏和肝脏中表达均显著,VEGF在AS肉鸡的心脏和肝脏中表达差异显著,在肺脏中表达差异不显著。
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