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背景:宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一。尽管手术和放化疗治疗有了很大的进步,恶性宫颈癌仍有较高的死亡率。肿瘤的侵袭和转移是影响宫颈癌预后的主要因素,深入研究宫颈癌侵袭转移机制是当下亟待解决的研究课题。CCL20/CCR6是肿瘤微环境中的趋化因子的成员,高表达于肝癌、胰腺癌和乳腺癌等肿瘤,与肿瘤的预后不良相关。AEG-1在肝癌、神经母细胞瘤和乳腺癌等肿瘤侵袭转移中发挥作用。但是CCL20/CCR6和AEG-1在宫颈癌中的作用和机制不太明确。目的:明确CCL20/CCR6和AEG-1在宫颈癌组织中的表达及临床意义,研究CCL20/CCR6对宫颈癌细胞增殖和侵袭的作用,探索AEG-1在CCL20/CCR6促宫颈癌细胞增殖和侵袭中的作用。方法:收集94例原发性宫颈癌患者组织标本、外周血和临床病理资料,同期排除宫颈病变、因子宫体良性疾病切除子宫的50例患者的宫颈组织为对照,同时收集对照组外周血和临床病理资料。应用免疫组织化学技术检测宫颈癌组织中CCL20、CCR6的表达,然后分析其与患者临床病理特征的关系。利用ELISA检测宫颈癌患者和对照组患者外周血CCL20水平。分别用RT-PCR、Western Blot检测宫颈癌细胞HeLa、SiHa、C-33A中CCL20、CCR6的mRNA和蛋白表达水平。将不同浓度CCL20人重组蛋白与宫颈癌细胞HeLa、SiHa共培养,运用MTT法、细胞划痕实验、Transwell观察不同浓度CCL20作用下宫颈癌细胞增殖和迁移能力。利用RT-PCR技术、Western Blot实验检测不同浓度CCL20刺激下,宫颈癌细胞系vimentin、N-cadherin、MMP2的mRNA和蛋白表达。接着利用RNA干扰技术下调宫颈癌细胞HeLa、SiHa中CCL20的表达,然后运用MTT法、Transwell观察宫颈癌细胞HeLa、SiHa细胞增殖和迁移能力。利用免疫组织化学法检测宫颈癌、正常宫颈组织中AEG-1的表达,分析宫颈癌组织中AEG-1的表达与宫颈癌患者临床病理特征的相关性。运用Western Blot实验检测在不同浓度CCL20作用下宫颈癌细胞中AEG-1、p-Erk1/2和p-Akt蛋白表达。利用RNA干扰技术下调宫颈癌细胞中AEG-1的表达后,观察在CCL20刺激条件下,使用Western Blot检测vimentin、N-cadherin、MMP2、p-Erk1/2和p-Akt蛋白及细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK2蛋白的表达。运用流式细胞仪检测细胞周期的实验方法观察siRNA-AEG-1-HeLa、siRNA-AEG-1-SiHa与空白对照组细胞,计算各细胞周期细胞数,观察细胞增殖情况。结果:CCL20、CCR6在宫颈癌组织中有表达,CCL20和CCR6在宫颈癌组织中的表达与FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移有相关性（P<0.05）,而与年龄、组织分化程度无关。宫颈癌患者血清CCL20表达量高于对照组,且与患者FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移有相关性（P<0.05）。CCL20和CCR6在宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C-33A中均有表达,其中CCL20和CCR6在HeLa、SiHa中的mRNA和蛋白表达水平相对低于C-33A。用MTT法测Ong/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml和40 ng/ml人重组蛋白CCL20与HeLa细胞和SiHa细胞共培养24h后细胞增殖率,CCL20处理组细胞增值率高于空白对照组,差异有差异统计学意义（P<0.05）,细胞增值率随着CCL20作用浓度增加而增加。用细胞划痕实验检测Ong/ml、10 ng/ml、20 ng/ml和40 ng/ml CCL20与宫颈癌细胞共培养24h和48h后,发现Hela组和SiHa组细胞划痕修复率随CCL20作用时间和浓度增加而升高,且高于空白组,差异具有统计学意义（P<0.05）。Transwell检测Ong/ml、10 ng/ml、20 ng/ml和40 ng/ml CCL20与宫颈癌细胞共培养24h后发现Hela组和SiHa组细胞侵袭数随CCL20作用浓度增加而增加,且高于空白组,差异具有统计学意义（P<0.05）。0 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml 和 40 ng/ml CCL20 与 HeLa 和 SiHa 细胞共培养 24h 后,vimentin、N-cadherin、MMP2mRNA和蛋白的表达高于空白对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）,而且呈浓度依赖性升高。下调Hela和SiHa中CCL20表达后,si-CCL20-Hela、si-CCL20-SiHa组细胞增殖率和侵袭到滤膜下层细胞数都比con-RNA-Hela 和 con-RNA-SiHa 低,差异有统计学意义（P<0.05）。AEG-1 在宫颈癌组织中高表达,AEG-1表达量与FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移有关（P<0.05）,与年龄、组织分化程度无关（P>0.05）。0ng/ml、5ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml 和 40 ng/ml CCL20 与 HeLa 和 SiHa 细胞共培养 24 小时后,AEG-1、p-Erk和p-Akt蛋白表达高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,呈浓度依赖性增加。下调Hela和SiHa中AEG-1表达后48小时使用30ng/ml CCL20刺激,si-AEG-1-Hela 组和 si-AEG-1-SiHa 组 vimentin、N-cadherin、MMP2、p-Erk1/2、p-Akt蛋白表达均低于con-RNA-Hela和con-RNA-SiHa对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。30μMCCL20 与 si-AEG-1-SiHa 和 con-RNA-SiHa 共培养24小时后,si-AEG-1-SiHa组和si-AEG-1-Hela组进入细胞周期S期的数量少于con-RNA-SiHa和con-RNA-Hela对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。si-AEG-1-SiHa组中细胞周期相关蛋白Cyclin D1、CDK2蛋白表达量较con-RNA-SiHa低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:CCL20/CCR6、AEG-1在宫颈癌组织中有表达,与宫颈癌FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移相关。外周血CCL20升高与患者不良预后有关。AEG-1在CCL20/CCR6促进宫颈癌细胞增殖和侵袭中发挥作用。AEG-1通过Erk1/2和Akt通路介导CCL20/CCR6诱导EMT过程促宫颈癌发生侵袭,CCL20/CCR6-AEG-1-Erk1/2-EMT 和 CCL20/CCR6-AEG-1-Akt-EMT 通路有望成为抗宫颈癌进展的有效靶点,有助于宫颈癌临床治疗。