肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor，TNF)是一种由激活的巨噬细胞分泌产生的细胞因子，它最明显的生物特征是可以在体内或体外特异地杀伤肿瘤细胞，而对正常组织细胞无明显毒性作用。人TNF成熟肽分子由157个氨基酸组成，平均分子量为17，000道尔顿；是一个非糖基化、呈中等程度疏水性的蛋白质。近年来的研究发现，TNF除具有抗肿瘤活性外，还具有抗病毒感染，抑制病毒复制的功能；TNF可抑制脂蛋白脂酶活性，促进正常细胞的增殖，刺激骨吸收和抑制骨形成，表明TNF在内毒素介导的败血症休克、细胞的增殖分化和正常的骨重建中都具有重要作用；TNF通过增强多形核中性白细胞的细胞毒和吞噬活性，激活巨噬细胞，诱导产生其他细胞因子(如IL-1，M-CSF，β-IFN)，促进组织相容性抗原的表达，以及对淋巴细胞的直接刺激作用等多种途径参与机体的免疫调节，并与多种细胞因子，如IL-1，IL-2及各种干扰素具有协同作用。随着TNF理论研究的不断深入，TNF的应用研究也已进入Ⅰ期和Ⅱ期临床实验阶段。TNF作为一种有希望的抗肿瘤、抗病毒(尤其对AIDS病毒)生物制剂已引起人们的普遍关注。但是，TNF的研究在我国还刚刚开始，由于受到来源的限制，使这一研究无法深入，更不可能将TNF用于临床治疗。为解决这一问题，本工作应用PCR(多聚酶链反应)基因扩增技术，首次在国内分离、克隆了TNF cDNA，并在大肠杆菌中成功地表达了人肿瘤坏死因子，为国内应用基因工程手段大规模生产TNF创造了条件。实验的主要步骤和结果如下所述： 1．用PMA(佛波脂)诱导人前髓细胞性白血病细胞株HL-60，使之表达TNT mRNA。 2．从诱导细胞中分离的Poly(A)~+RNA，经逆转录合成cDNA；随后构建了一个具有2.0×10~5重组子的完整cDNA文库。 3．应用PCR基因扩增技术，以第一链cDNA为模板，分离并克隆了编码人TNF成热多肽所需的全部cDNA顺序(共615bp，包括135bp的3′-非编码序列)。