我们将通过大黄素升高活性氧,探讨氧化还原状态、NF-κ B与肿瘤细胞化疗敏感性的关系.该研究分为三部分:第一部分:双香豆素联用大黄素通过改变氧化还原状态增强肿瘤细胞对三氧化二砷促凋亡的敏感性;目的:通过联用醌类物质大黄素和醌类还原酶抑制剂双香豆素提高细胞的ROS水平,探讨氧化还原状态与肿瘤细胞凋亡敏感性的关系.结论:细胞氧化还原状态是决定肿瘤细胞对促凋亡信号敏感性的重要因素.第二部分:NF-κ B在细胞氧化还原状态调控凋亡过程中的作用;目的:从NF-κ B激活的多个环节,探讨联用双香豆素和大黄素如何影响HeLa细胞生死调控过程中NF-κ B的活性变化.结论:在HeLa细胞NF-κ B的激活主要发挥促生存抗凋亡的作用,大黄素联用双香豆素造成的氧化应激通过抑制NF-κ B与靶DNA的结合,阻止NF-κ B促进下游基因的表达,这一调控方式的最终效应是使细胞抗凋亡的力量得到削弱,从而使HeLa细胞对As<,2>O<,3>的促凋亡敏感性增强.第三部分:NF-κ B活性受细胞氧化还原状态调控的分子机理;目的:对细胞内氧化还原状态的改变引起NF-κ B活性抑制的机理进行探讨,从而揭示活性氧轻度升高促进细胞生存和增殖,而剧烈升高则触发细胞死亡这一矛盾现象的本质;并且通过人为突变氧化还原敏感位点,从分子水平阐述大黄素增强肿瘤细胞化疗敏感性的机理.结论:大黄素主要通过造成细胞核内氧化程度增强,使NF-κ B等转录因子发生对应的氧化修饰,抑制它与DNA的结合及促进转录的活性,从而使细胞抗凋亡的力量削弱,凋亡敏感性增强.总之,该研究通过对氧化还原状态调控NF-κ B活性的探讨,从分子水平阐述了大黄素通过改变细胞氧化还原状态增强肿瘤细胞化疗敏感性的机理.该研究结果有助于揭示活性氧轻度升高促进细胞生存和增殖,而剧烈升高则触发细胞死亡这一矛盾现象的本质,对于深入理解活性氧调控细胞生死和影响肿瘤细胞化疗敏感性的机制具有重要的理论意义,同时,该研究结果提示使用活性氧生成剂、醌类氧化酶抑制剂和NF-κ B抑制剂等方案以促使耐药肿瘤敏感的可能性,对临床肿瘤治疗具有实际意义.