食线虫真菌Duddingtonia flagrans SF-170次级代谢产物分离鉴定及生物活性研究

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食线虫真菌是一类作为线虫的天敌存在于自然界微小真菌,在自然界的生态平衡中发挥着重要的作用。真菌的天然产物作为常用抗生素的重要来源之一,一直以来都是深受着人们广泛的研究。然而目前对食线虫真菌次生代谢产物的研究相对较少,从中分离的化合物种类以及生物活性研究研究匮乏。本研究对食线虫真菌Duddingtonia flagrans SF-170的次生代谢产物进行了初步的研究,并对所分离出的化合物进行生物活性的测定,包括抗菌活性、抗肿瘤活性以及抗线虫活性。对食线虫真菌菌株D.flagrans SF-170进行30L发酵,将发酵液过滤上清用大孔树脂吸附,菌体经乙醇浸提,乙酸乙酯萃取、浓缩得到283 g浸膏,浸膏经硅胶柱层析、LH-20凝胶柱层析、高效液相色谱法等分离纯化得到7个化合物。利用一维、二维核磁共振(NMR)、结合高分辨质谱(HRMS)、红外(IR)、紫外(UV)和电子圆二色谱(ECD)计算等现代波谱分析技术对其分离的化合物进行结构鉴定,并结合文献进行分析。鉴定结果表明其中两个为新的化合物,命名为(1R,5S,6S)-5-hydroxy-1-((R,2E,6E)-1-hydroxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,6,10-trienyl)-4-methyl-7-oxabicyclo[4.1.0]hept-3-en-2-one(1)和((1S,2R,5S,6R)-2,5-dihydroxy-6-((2E,4Z,6E)-1-hydroxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,4,6,10-tetraenyl)-7-oxa-bicyclo[4.1.0]hept-3-en-3-yl)methyl acetate(3),三个为疑似新的化合物,但其中一个结构不稳定,另外两个分离出的量太少,所以没法确定其绝对构型,暂时命名为(1R,6R)-5-hydroxy-6-((R,2E,6E)-1-hydroxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,6,10-trienyl)-3-methyl-7-oxabicyclo[4.1.0]hept-3-en-2-one(2),1-((2E,4E,6E)-1-hydroxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,4,6,10-tetraenyl)-4-methylene-7-oxa-bicyclo[4.1.0]heptane-2,3,5-triol(5)和(1R,6R)-5-hydroxy-3-methyl-6-((2E,6E)-3,7,11-trimethyldodeca-2,6,10-trienyl)-7-oxabicyclo[4.1.0]hept-3-en-2-one(7),,其余两个为已知化合物oligosporol B(4)和7-deacetoxyyanuthone A(6)。对除了化合物5以外的其余化合物进行了生物活性的测定,结果显示对金黄色为葡萄球菌、白色念珠菌以及大肠杆菌都没有活性,对青枯菌和水稻纹枯表现出微弱的活性。所有化合物对人体结肠癌细胞HCT-116、人体肝癌细胞HepG2和人非小细胞肺癌细胞A549均表现出偏中等活性,其中化合7的活性对三种肿瘤细胞的活性相对较好。几种化合物对秀丽隐杆线虫均没有活性。本研究成果提高食线虫真菌的综合利用有重要的参考意义。
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