背景:TTC9A是一种新发现的原肌球蛋白Tm5NM-1的伴侣蛋白,是TTC9家族的成员之一,具有稳定细胞微丝骨架和参与细胞转移的功能。研究表明TTC9A在乳腺癌等恶性肿瘤组织中表达上调,参与癌细胞的转移和侵袭,很可能发挥促癌基因的作用。然而,TTC9A在肺腺癌中的表达情况、生物学功能及作用机制尚不清楚,对其深入研究将有助于为肺腺癌的早期诊断、化疗治疗和预后评估提供理论基础。方法:1.采用免疫组织化学检测结合多种生物信息数据库挖掘,分析肺腺癌患者肿瘤组织和正常肺上皮组织中的TTC9A表达情况。评估TTC9A m RNA表达水平与患者临床病理特征及预后的相关性。生物信息学分析肺腺癌中与TTC9A共表达基因的功能及富集通路。利用x CELL、TIMER等工具预测TTC9A m RNA表达与肿瘤免疫微环境的关系。2.采用q PCR和Western blot检测四株肺腺癌细胞系A549、H1299、PC9、NCI-H1975中TTC9A的m RNA和蛋白质表达情况。构建沉默TTC9A表达以及阴性对照（negative control,NC）的慢病毒载体,转染肺腺癌细胞株,筛选和建立稳定转染的细胞系。在体外实验中,采用CCK-8实验和平板克隆形成实验检测沉默TTC9A表达对肺腺癌细胞增殖能力的影响。采用流式细胞术检测沉默TTC9A表达对肺腺癌细胞凋亡和周期分布的影响。通过建立裸鼠皮下移植瘤模型,观察TTC9A表达改变对肺腺癌细胞体内成瘤能力的影响。3.利用划痕愈合实验、Transwell实验观察TTC9A表达对肺腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。采用Western blot实验检测TTC9A表达对肺腺癌细胞中上皮-间质转化（EMT）相关指标、MMP-9表达的影响。4.采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测顺铂对沉默TTC9A表达后的PC9细胞活性的影响。采用q PCR和Western blot检测沉默TTC9A表达后肺腺癌细胞中多药耐药相关蛋白MRP1的表达水平。采用流式细胞术检测顺铂对沉默TTC9A表达后的PC9细胞凋亡的影响。采用Western blot检测肺腺癌细胞中沉默TTC9A表达后p38MAPK和MDM2/p53信号通路关键分子的表达变化。结果:1.TCGA数据库分析及免疫组化结果显示,肺腺癌组织中的TTC9A表达水平均显著高于正常肺组织中的表达水平,且TTC9A表达与性别、淋巴结转移和死亡状态密切相关。TTC9A表达是预测肺腺癌总生存期（OS）、无进展间隔（PFI）和无病间隔（DFI）的独立生物标志物。TTC9A可能作为肺腺癌诊断、预后评价的新型生物学指标。2.在遗传和表观遗传水平上,TTC9A表达受到DNA缺失和扩增以及低甲基化水平的调控。TTC9A表达与肿瘤免疫浸润水平密切相关。基因富集分析发现与TTC9A共表达的最显著的基因是TSPAN15、SYTL2和GPR110,与TTC9A m RNA表达呈正相关。基因富集分析结果显示,在肺腺癌中与TTC9A共表达的上调基因主要参与蛋白质结合转运、生长发育方面,涉及p53、细胞外基质结合、细胞黏附等信号通路。3.q RT-PCR和Western blot检测结果均显示,TTC9A在肺腺癌细胞系A549、PC9、NCI-H1975、H1299中均有表达,其中PC9表达量最高。成功筛选出了沉默TTC9A表达及阴性对照的稳转肺腺癌细胞株。4.沉默TTC9A表达抑制了PC9细胞体内外的增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡,导致细胞周期G2期阻滞,提高了对顺铂的敏感性。5.Western blot结果显示,沉默TTC9A表达能够显著下调N-cadherin、Vinmentin、Snai1、Snai2、p38、p-p38、MDM2、MRP1蛋白表达水平,并同时上调E-cadherin、p53蛋白表达水平。结论:TTC9A在肺腺癌组织中显著高表达,不但与患者的性别、淋巴结转移和生存状况相关,还与肺腺癌的不良预后和免疫浸润密切相关。沉默TTC9A表达抑制肺腺癌细胞的增殖能力,促进细胞发生凋亡,导致细胞周期G2期阻滞周期无法顺利进行。TTC9A通过p38MAPK和p53/MDM2信号通路调控EMT、凋亡信号、多药耐药相关蛋白进而调控肺腺癌的发生和发展。TTC9A很可能成为肺腺癌诊断、预后和治疗的新型分子靶点。