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红花是一种常见的活血化瘀的中药,也是一种药食同源的植物。红花中含有多种营养成分和生物活性物质,其中,黄酮类化合物含量丰富。研究发现黄酮类化合物是一类有效的酪氨酸酶抑制剂。本文对红花黄酮类化合物(Safflower Flavonoids,SF)的制备工艺进行优化,研究其对酪氨酸酶的抑制活性和其对苹果切片的保鲜效果。1对SF的微波提取工艺进行了探讨。实验采用单因素实验与正交实验,分别考察了乙醇浓度、微波时间、微波功率、微波温度及料液比对SF提取率的影响。实验结果表明最佳的提取条件为:乙醇浓度60%,料液比1:35,微波功率800W,微波时间25min,微波温度50℃,提取2次,得到红花黄酮粗提物(Safflower Flavonoid Extracts,SFE)。在此条件下,SF的提取率达到10.231%。2比较4种大孔树脂对SFE的吸附与解吸效果,从中筛选出适合SFE分离纯化的树脂,并通过单因素实验对其吸附与解吸工艺进行探讨。得到结论为:AB-8是纯化红花总黄酮较好的树脂。静态吸附:最佳树脂用量是1:10(g/m L),最佳上样浓度为3mg/mL,最适pH值为4.7,吸附6h,解吸时间4h;动态吸附:上样流速为2BV/h,上样浓度为3mg/m L,70%乙醇以2BV/h流速进行洗脱。用优化出的条件进行SF的纯化,得到红花黄酮纯提物(Safflower Flavonoid Purfication,SFP)的黄酮纯度63.31%,比纯化前的21.85%提高2.89倍。3研究了SFP对酪氨酸酶的抑制及其机理。以L-酪氨酸为底物,对SFP抑制酪氨酸酶活性进行动力学研究,并研究SFP清除自由基和螯合金属离子的作用,探讨其对酪氨酸酶的抑制机理。结果表明,在实验浓度范围内,SFP对酪氨酸酶均具有抑制性,且当红花黄酮提取物浓度为3.0mg/mL时,抑制率达到最大值78.03%;IC50值为0.834mg/mL,抑制常数KI为0.036mg/mL,KIS为0.0064mg/mL。当SFP的浓度为3mg/mL时,SFP对酶的抑制率达63.5%。另外,SFP对DPPH·,羟基自由基和超氧阴离子均具有一定清除力;Cu2+、Fe2+与红花黄酮形成稳定的配合物,导致其紫外吸收曲线发生较大变化,实验结果说明:SFP对酪氨酸酶有显著的抑制作用,抑制类型为可逆的混合型抑制。同时,SFP通过清除自由基和螯合金属离子达到抑制酪氨酸酶活性的效果。4研究红花黄酮对鲜切苹果片的保鲜。以不同浓度的SFE、SFP处理鲜切苹果片,考察对苹果片褐变度、TSS含量和VC含量的影响。结果表明:1mg/mL的SFE,浸泡2min后,苹果切片的褐变度为4.44,TSS含量为10.5%,VC含量为0.017mg/100g。研究说明,红花黄酮对苹果片具有保鲜作用。5 SFP经过Sephadex LH-20初步分离,对比高效液相色谱图和紫外吸收光谱,可以确定收集的组分中的黄酮类化合物为羟基红花黄色素A和芦丁。