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目的:目前,大量研究表明,藏药二十五味松石丸对肝病具有一定的治疗作用,且在藏区应用广泛。但藏药复方中普遍含有一些重金属成分,其中朱砂、松石等矿物药存在含量超标的问题,对药物安全性有很大的影响,从而一直受人们关注。本课题通过分析藏药二十五味松石丸的配伍特点,将二十五味松石丸进行减方(减朱砂和松石),并比较减方前后对大鼠慢性肝纤维化防治作用的研究,探讨原方减方后治疗肝病有效且安全的可行性。以期为藏药组方的优化和临床用药的安全提供参考。方法:1.本研究通过查阅《四部医典》、《新修晶珠本草》等藏医药典籍,概括二十五味松石丸中所含25味药的“味”、“性效”并分析二十五味松石丸的药“味”、“性效”的配伍特点,整理出21种常用治疗肝病的藏药方剂,统计二十五味松石丸的各成分药在21种常用治疗肝病藏药方剂中单味药的使用频次和药对配伍频次,并进行分析。探讨了二十五味松石丸原方的配伍特点及其治疗肝病的核心组合成分。2.对二十五味松石丸进行减方即去除含重金属成分朱砂和松石,得到去除重金属的原方减朱砂组、原方减松石组、原方减朱砂和松石组。3.取56只Wistar大鼠随机分为7组:模型组、空白对照组、阳性对照组(复方鳖甲软肝片630mg/kg)、二十五味松石丸(105mg/kg)组、原方减朱砂(103mg/kg)组、原方减松石(98mg/kg)组、原方减朱砂和松石(97mg/kg)组。连续8周对各组大鼠皮下注射40%CCL4橄榄油溶液,空白对照组除外。在造模期间,用等量的生理盐水灌胃给予模型组和空白对照组。其余各组大鼠灌胃给予相应的药物,并在8周末处死大鼠。检测大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT)和白蛋白(AL)的水平,通过ELISA测定大鼠透明质酸(HA)、羟脯氨酸(HYP)、层粘连蛋白(LN)和转化生长因子-β1(TGF-β1)。进行常规HE染色并观察大鼠的肝组织病理变化,采用Masson染色,观察各组大鼠肝脏肝纤维化的程度。结果:1.通过二十五味松石丸的配伍特点及其治疗肝病的核心组合成分的探讨,结果表明,二十五味松石丸是以清热药配伍为主的组方,主要治疗热性肝病,其核心组合成分为西红花和牛黄。2.藏药二十五味松石丸减方前后对大鼠慢性肝纤维化的防治作用研究,结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、LN、HA、TGF-β1和HYP水平显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,二十五味松石丸(105mg/kg)组,原方减少朱砂和松石(97mg/kg)组大鼠血清TGF-β1、HA、LN和HYP水平显著降低(P<0.05,P<0.01),大鼠肝纤维化面积明显减少(P<0.05,P<0.01)。结论:通过实验说明,二十五味松石丸减方前后均对CCL4所致大鼠慢性肝纤维化具有一定的防治作用,以二十五味松石丸组的防治作用最佳,原方减朱砂和松石组次之,原方减朱砂组和原方减松石组的防治作用均最差。