低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉SOCC的时间曲线以及5-羟色胺和内皮素-1的作用

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目的:研究Ca2+池操纵性(SOCC)和受体操纵性通道(ROCC)在慢性低氧诱发肺动脉高压发病过程中的作用,及其病理生理学意义。方法:将正常SD大鼠置于常压含10%氧气的低氧室3~4周以制备慢性低氧性肺动脉高压大鼠模型。测定以下指标:①平均右心室内压(mRVP);②右心重量指数(RVMI)= 100%)左心室重量右(心L室V重+量室(间R隔V)重量(VS×;③H E染色观察肺动脉结构重建;④RT-PCR检测大鼠肺动脉TRPC1和TRPC6 mRNA表达的时间曲线;⑤环匹阿尼酸(CPA)或OAG诱导离体肺动脉环(PAs)收缩效应的时间曲线;⑥5-羟色胺(5-HT)和内皮素-1(ET-1)诱发PAs收缩张力的量效曲线;⑦不同Ca2+通道阻断剂对5-HT、ET-1预收缩的阻断作用。结果:与正常对照组(NOR组)相比:①慢性低氧组(CH组)的mRVP和RVMI明显增高(P<0.01);②CH组HE染色可见肺小动脉平滑肌层明显增厚,管腔减小;③经典瞬间感受器电位蛋白1(TRPC1)的mRNA表达明显增高,其时间曲线表现为在低氧早期(1d)即显著增加(较NOR组增加2倍,P<0.01),3d时达最高水平(较NOR组增加了5倍,P<0.01),并可在7d内维持在高水平,14d后略有下降,至21d保持在NOR组的2倍(P<0.01),CH组CPA诱导的PAs收缩效应显著增强(P<0.01),其时间间曲线与TRPC1 mRNA表达时间曲线基本一致;⑤经典瞬间感受器电位蛋白6(TRPC6)的mRNA表达明显增高,其时间曲线表现为双相增高的变化,在低氧1d即显著增加(P<0.01),随后下降,5d时增加量达最低值(P<0.01),7d、14d和21d又逐步增加,至21d增加量达最大值(P<0.01);NOR组OAG几乎不引起PAs收缩,CH组OAG引起的收缩反应与NOR组比较差别无显著性意义;⑥CH组PAs对5-HT(1nmol/L~100μmol/L)及ET-1(0.01~10 nmol/L)敏感性增强,其量效曲线均明显左移。⑦30μmol/L La3+对30μmol/L 5-HT或10nmol/L ET-1预收缩PAs血管环效应的阻断作用在CH组显著增高(P<0.01),但30μmol/L SKF 96365的阻断作用无显著性意义。结论:慢性低氧3~4周,①可诱导SD大鼠产生肺动脉高压,并诱发肺动脉及右心室重构;②低氧早期(1周内)即显著上调了编码TRPC1的mRNA的表达,并增强TRPC1/SOCC所介导的血管收缩功能;③在低氧后期(3周)显著上调了编码TRPC6的mRNA的表达,但对TRPC6/ROCC所介导的血管张力无显著增强效应。④左移5-HT和ET-1诱发的PAs动脉环收缩的量效曲线;⑤SOCC功能的上调可能是CH组5-HT和ET-1高反应性的一种机制。本研究为TRPC1/SOCC做为将来治疗肺动脉高压相关疾病的靶目标提供病理生理学依据。
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